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采用反向嵌套PCR法,根据已获得的辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶cDNA的部分序列,设计一条5′末端磷酸化的特异性反转录引物和两对特异性反向嵌套PCR引物,成功地克隆了辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶cDNA′末端。与锚定PCR法相比,反向嵌套PCR法具有特异性强、扩增效率高等优点,是一种非常有效的扩增cDNA5′末端序列的方法。