目的 观察血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)刺激人肾上腺皮质癌H295R细胞后醛固酮合成酶(CYP11B2)mRNA及醛固酮激素的改变,探讨类固醇生成因子-1(SF-1)基因沉默在介导该反应中的作用.方法 用携带U6启动子和SF-1特异性短发夹RNA(shRNA)序列的质粒载体pGenesil1-SF-1-shRNA及含非特异性shRNA编码序列的阴性对照质粒pGenesill-negative-shRNA转染人肾上腺皮质癌H295R细胞,应用Westem blot和荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测SF-1表达的改变,以100 nmol/L浓度ATⅡ刺激实验组和对照组细胞,检测ATⅡ刺激后3、6、9、12、15、18 h时间点CYP11B2 mRNA表达水平,与未刺激时对比,检测两组细胞CYP11B2 mRNA的最大增幅.用放射免疫法测定醛固酮激素在ATⅡ刺激24 h后的分泌水平,对比两组细胞醛固酮增幅.结果 实验组细胞SF-1在蛋白水平和mRNA水平分别下降了69.07%和71.20%(P＜0.01).ATⅡ刺激后12 h时CYP11B2 mRNA表达水平最高,与未刺激前比较,实验组和对照组的CYP11B2 mRNA增幅分别是50.21倍和800.09倍(P＜0.01),后者是前者的15.93倍(P＜0.01).同样,ATⅡ刺激后醛固酮激素分泌水平均升高,对照组细胞刺激前后分别为(0.061±0.007)μg/L和(0.256±0.014)μg/L(P＜0.01);而实验组醛固酮激素在ATⅡ刺激前后则分别为(0.101±0.010)μg/L和(0.252±0.016)μg/L(P＜0.01),两组比较,前者增幅高于后者1.7倍(P＜0.01).结论 SF-1表达下调可以降低CYP11B2 mRNA及醛固酮对ATⅡ的敏感性和反应性。
类固醇生成因子-1基因沉默在介导血管紧张素Ⅱ对醛固酮分泌调控的影响
【摘 要】
：
目的 观察血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)刺激人肾上腺皮质癌H295R细胞后醛固酮合成酶(CYP11B2)mRNA及醛固酮激素的改变,探讨类固醇生成因子-1(SF-1)基因沉默在介导该反应中的作用.方法 用携带U6启动子和SF-1特异性短发夹RNA(shRNA)序列的质粒载体pGenesil1-SF-1-shRNA及含非特异性shRNA编码序列的阴性对照质粒pGenesill-negative-shRNA转
【机 构】
：
430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,解放军总医院内分泌科,430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,解放军总医院泌尿外科,430030,武汉,华中科技
【出 处】
：
中华实验外科杂志
【发表日期】
：
2010年27期
论文部分内容阅读
其他文献
膀胱癌早期诊断并根据其生物学特点采取有效的治疗方法,治疗后严密随访提高患者的总体生存率,一直是泌尿外科研究的重要课题.膀胱镜检查是诊断和治疗后随访的最主要手段,被视为膀胱肿瘤诊断的金标准,但其是有创检查,往往会带给患者痛苦和恐惧,还可能导致尿路感染,这使膀胱镜检查的临床应用受到限制.因此,人们不断努力寻找对膀胱癌理想的早期诊断和监测的方法--敏感性高,特异性强,且操作简便,费用低廉,并且在形成肉眼
期刊
在高原环境下,休克患者更易氧代谢障碍,其是危重症病情发展的病理生理基础.Toms发现液体中加入少量的高分子聚合物后,液体阻力显著减小,把高分子聚合物称为减阻剂.研究显示,芦荟多糖(AP)是一种天然高分子聚合物的减阻剂,可改善休克动物的微循环灌注[1].本实验旨在观察AP对高原重度创伤性休克大鼠脑氧代谢的影响。
期刊
毛细血管渗漏综合征(Capillary leak syndrome,CLS)是由于毛细血管内皮细胞损伤、血管通透性增加而引起毛细血管水肿,大量血浆蛋白渗透至组织间隙,从而出现低蛋白血症、低血容量休克、急性肾缺血等临床表现的一组综合征。
期刊
真核生物中,小分子非编码核糖核酸(RNA)的作用主要为序列特异性的基因表达负调控,包括RNA干扰(RNAi)、翻译抑制和异染色质形成等,即RNA基因沉默[1].随着研究的深入,发现许多非编码小分子RNA的胞内蛋白质合作者,参与了小RNA的加工成熟和在细胞内行使功能,其中发挥重要核心作用的Argonaute(Ago)蛋白引起了众多科学家的高度重视。
期刊
膀胱尿路上皮肿瘤是泌尿系统最常见的肿瘤之一[1].与许多实体肿瘤一样,其发生、发展和转移与血管新生关系密切[2-3].正常血管新生依赖于刺激性和抑制性细胞因子表达的平衡,若表达失调则导致肿瘤血管过度生长,促进了肿瘤的生长和转移[3].血管内皮生长因子(VEGF)与色素上皮衍生因子(PEDF)分别是目前已知最强的血管新生刺激因子与抑制因子,我们应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PC
期刊
目的 构建并鉴定由具有肿瘤特异性启动作用的生存素启动子(Survivin Promotor)驱动4-1BBL(CD137 Ligand)基因的腺病毒载体.方法 用聚合酶链反应(PCR)和逆转录(RT)-PCR的方法,分别从人肺癌细胞株A549中克隆Survivin启动子和共刺激分子4-1BBL基因,通过T载体和转移载体将目的基因亚克隆到腺病毒载体上,293A细胞包装成病毒颗粒rAD-Survivi
我们建立糖尿病大鼠骨质疏松骨缺损模型,利用血管内皮生长因子(VEGF)基因修饰大鼠脂肪干细胞(ADSCs)对此类骨缺损进行修复,观察VEGF基因修饰脂肪干细胞对糖尿病骨质疏松性骨缺损修复作用的效果.一、材料和方法
期刊
目的 观察新型铁螯合剂CHGN2957对大鼠肾缺血再灌注损伤(I/R)急性期的保护作用.方法 选用雄性SD大鼠90只,随机分成5组(n=18):假手术组、CHGN2957高剂量组、低剂量组、溶剂组和阳性对照组.建成大鼠急性肾I/R模型.药物干预均从手术前2 d开始,直至术后12 d结束.观察大鼠死亡率、体质量变化,测定肾功能和肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)还原酶活力和丙二
目的 观察细胞减灭术(CRS)加腹腔热灌注化疗(HIPEC)治疗胃癌腹膜转移癌(PC)的疗效和安全性.方法 取成年雄性新西兰大白兔42只,将VX2癌细胞注入胃窦部黏膜下,制成溃疡型胃癌PC模型,随机分为空白组(n=14)、单纯CRS组(n=14)、CRS+HIPEC组(n=14).种瘤后第8～9天行治疗,HIPEC药物为多西紫杉醇(10 mg/只)、卡铂(40 mg/只),42 ℃腹腔灌注30 m