【摘 要】
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目的 应用免疫功能正常的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)小鼠模型评价中药苦参碱和青蒿素的作用效果,同时为模型应用奠定基础.方法 体外合成HBV共价闭合环状DNA(covale
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院,重庆400010;重庆医科大学实验动物中心,重庆400016;重庆医科大学实验动物中心,重庆400016;泸县第二中学,泸州646106;重庆市科学技术研究院,重庆40112
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目的 应用免疫功能正常的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)小鼠模型评价中药苦参碱和青蒿素的作用效果,同时为模型应用奠定基础.方法 体外合成HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),通过尾静脉高压注入8～10周龄的雄性CBA/CaJ小鼠体内,然后分别在急性感染期和慢性感染期腹腔注射苦参碱或青蒿素.定量PCR法检测小鼠血清及肝组织中HBV DNA和cccDNA含量,酶联免疫吸附法检测血清中HBV表面抗原(HBV surface antigen,HBsAg)的含量,免疫组织化学法检测肝组织中HBsAg和HBV核心抗原(HBV core antigen,HBcAg)的表达.结果 在HBV急性感染期,注射苦参碱和青蒿素第4周即能够明显抑制小鼠血清中HBsAg的分泌(均P＜0.05),降低血清中HBV DNA的表达(均P＜0.01).在HBV慢性感染期,苦参碱和青蒿素对小鼠血清和组织中HBsAg的抑制作用不明显(均P＞0.05),但是血清中HBsAg相对降低水平(△HBsAg)明显大于生理盐水对照组(均P＜0.05);而且苦参碱能降低小鼠血清或组织中HBV DNA(P＜0.05,P＜0.01)和组织中HBV cccDNA的拷贝数(P＜0.05);青蒿素仅能明显抑制小鼠血清中HBV DNA拷贝数(P＜0.01),而对组织中HBV DNA和HBV cccDNA的作用不明显(均P＞0.05);另外,苦参碱对肝组织中HBcAg的作用不明显(P＞0.05),而青蒿素对HBcAg有明显的抑制作用(P＜0.05).结论 免疫功能正常的HBV cccDNA小鼠模型能够用于治疗急性期和慢性期乙型肝炎的药物疗效评价.
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