【摘 要】
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目的研究用慢病毒载体进行基因转染对小鼠胚胎干细胞(ESC)特性的影响。方法慢病毒载体经293FT细胞包装后转染小鼠ESC,荧光显微镜下挑选和观察所得阳性克隆,检测ESC特异性标志
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目的研究用慢病毒载体进行基因转染对小鼠胚胎干细胞(ESC)特性的影响。方法慢病毒载体经293FT细胞包装后转染小鼠ESC,荧光显微镜下挑选和观察所得阳性克隆,检测ESC特异性标志物Oct-4、SSEA-1的表达,通过拟胚体(EB)诱导体外分化,RT-PCR检测三胚层的分化。结果形态学观察可见所得绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞呈克隆样鸟巢状生长,免疫组化可见GFPESC表达ESC特异性标志Oct-4、SSEA-1,能形成EB,RT-PCR检测到甲胎蛋白(AFP)、巢蛋白(Nestin)和血管内皮生长因子受体(Flk-1)的表达。结论慢病毒载体介导的基因转染不影响小鼠ESC的自我更新特性及多向分化潜能。
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