【摘 要】
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目的观察Ⅱ型肺泡细胞组织因子途径抑制物1(tissue factor pathway inhibitor 1,TFPI-1)基因敲除对细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung inj
【机 构】
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复旦大学基础医学院代谢与分子医学教育部重点实验室,复旦大学附属中山医院呼吸科,复旦大学附属儿科医院儿童发育与疾病转化医学研究中心
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目的观察Ⅱ型肺泡细胞组织因子途径抑制物1(tissue factor pathway inhibitor 1,TFPI-1)基因敲除对细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响。方法将Tfpi-1flox/flox转基因小鼠和表面活性蛋白A(surfactant-associated protein A,Spa)-环化重组酶(cyclization recombination enzyme,Cre)转基因小鼠交配,获得Tfpi-1flox/flox:Spa-Cre基因型小鼠(C57BL/6J),使用免疫组化和荧光定量PCR检测不同基因型小鼠肺组织中TFPI-1的表达差异。LPS诱导ALI 24 h后运用体积描记法和有创呼吸功能检测法检测小鼠的呼吸功能;通过肺泡灌洗,计数肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞的数目;BCA法测定BALF中总蛋白水平;ELISA测定BALF中纤溶酶原激活物抑制因子1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)的浓度,HE染色观察肺损伤的程度;计算肺湿/干重比(wet/dry weight ratio,W/D)。结果未干预情况下,Tfpi-1flox/flox:Spa-Cre基因型小鼠相对于野生型小鼠肺部结构和呼吸功能无明显变化。LPS诱导后,Tfpi-1flox/flox:Spa-Cre基因型小鼠相对于野生型小鼠肺损伤分数、BALF中白细胞总数、W/D和BALF中PAI-1浓度显著升高,潮气量(tidal volume,TV)、每分通气量(minute ventilation,MV)、吸气时间(inspiratory time,Ti)、肺动态顺应性(dynamic lung compliance,C)有降低趋势,而呼气时间(expiratory time,Te)、气道阻力(airway resistance,R)有升高趋势。结论Ⅱ型肺泡细胞条件性敲除Tfpi-1基因促进了LPS诱导的小鼠ALI,影响了小鼠的呼吸功能。
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