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目的 克隆激活转录因子(ATF)5,构建其真核表达载体,观察其在细胞中的表达定位.方法根据人ATF5的cDNA序列设计引物,通过巢式PCR扩增ATF5全长及其N端(ATF5/N)和C端(ATF5/C),构建重组表达质粒pCS2MT-ATF5、pCS2MT-ATF5/N和pCS2MT-ATF5/C及融合绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pEGFP-ATF5.将表达质粒转染293T和Cos-7细胞,Western blot检测其表达情况,荧光显微镜观察ATF5在293T和Hela细胞的定位.结果巢式PCR产物与预期大小一致,重组质粒pCS2MT-ATF5、pCS2MT-ATF5/N和pCS2MT-ATF5/C能表达携带Myc标签的蛋白Myc-ATF5、Myc-ATF5/N和Myc-ATF5/C,分子量分别为52、35和43×103.荧光显微镜观察发现融合了GFP的ATF5蛋白定位在细胞核.结论成功的克隆和表达ATF5基因为进一步研究其在肾肿瘤发生、发展过程中的作用奠定了基础。