猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I基因的克隆、表达及其ELISA检测方法的建立

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根据胸膜肺炎放线杆菌S4074菌株毒素I的序列,设计了1对引物,从本室自己分离的菌株中扩增了猪胸膜肺炎放线杆菌毒素I的结构基因(apxICA),扩增的DNA片仅大小为3640bp(4687~8326bp),将其克隆到pMD18-T载体中,酶切鉴定和序列测定后,进一步将其插入pET-28a中构建了原核表达载体,SDS—PAGE和Western blotting分析表明,该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了表达,而且表达的蛋白质具有免疫学活性。利用表达的蛋白作为抗原包被酶标板,建立了检测毒素I血清抗体的
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