哺乳动物细胞杂交中降低聚乙二醇毒性的简易方法

来源 :细胞生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong597
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<正> 聚乙二醇(PEG)对某些细胞系具有高度毒性。作者将两个仓鼠细胞的温度敏感突变株 AF8和 K12细胞接种于平皿内,在贴壁、伸展后,加入50%的 PEG 溶液诱导细胞融合。所用的 PEG 有二种:1.Baker PEG,2 Koch-Light PEG,分子量均为1000。PEG 作用30秒钟后冼去,加入生长培养液,置于温度敏感突变株的许可温度34℃下培养16~24小时,再移至非许可温度40.6℃下培养二周。其间每隔3—4天更液一次。上述部分材料在34℃培养后,以胰酶消化,用生长培养液1:20稀释居再接种于平皿内,于40.6℃培养.12~15天后染色,计算集落数。同时在缺钙的培养液内用 PEG 诱导细胞
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