论文部分内容阅读
摘要[目的]研究中药治疗奶牛乳房炎的最佳制备工艺。[方法]通过设计，筛选较适宜的粉碎时间和混合比例；采用薄层色谱法（TLC）建立新中药组方有效成分的检测方法。[结果]确认了该组方最佳制备工艺为粉碎时间45 min，混合比例为1.0∶1.0∶0.4；确定有效成分中蒲公英、漏芦、当归、川芎薄层鉴别结果，供试品色谱中，均在与对照品色谱相应的位置上出现相同颜色的荧光斑点。[结论]优选粉碎时间和混合比例是组方制备的安全有效方法。建立的检测项可以用于有效成分的质量控制。
关键词 本草乳炎清散；奶牛乳房炎；工艺制备；正交试验；薄层色谱法
中图分类号 R28 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）03-0154-03
Abstract[Objective] To study the technology of traditional Chinese medicine in the treatment of mastitis in dairy cows. [Method] Orthogonal test was conducted to screen out suitable grinding time and mixing ratio；TLC method was adopted to establish detection method for effective components in new medicines. [Result] The optimal preparation conditions were crushing time 45 min， mixing ratio 1.0∶1.0∶0.4；TLC identification results of Taraxacum mongolicum， Rhapontisum unflorum， Angelica sinensis， Ligusticum wallichii were determined. Fluorescent spots of the same color appeared in the corresponding position of the control product chromatography. [Conclusion] Optimal grinding time and mixing ratio is a safety and effective method for prescription preparation. Established test items can be used for quality control of effective constituents.
Key words Herbal breast inflammation powder；Cow mastitis；Prescription preparation；Orthogonal test；TLC
奶牛乳房炎是由于細菌感染或機械性损伤造成的，引起奶牛一系列病症，并造成牛奶品质下降的奶牛常见病症。目前，全世界约有2.2亿头奶牛，其中约有1/3左右的奶牛患有各种类型的乳房炎[1]。而在奶牛养殖过程中，治疗奶牛乳房炎通常选择西药治疗，即抗生素疗法，虽然其治疗见效快，但因牛奶中容易出现药物残留，导致牛奶品质下降，造成经济损失[2]。
本草乳炎清散是针对奶牛乳房炎开发的新型的中草药制剂，该制剂尚未在国内外市场上市销售。由纯中药组成，成本低廉，使用方便，不易产生耐药性，毒副作用小，不含任何添加剂，绿色无残留[3]，符合自治区创新型计划，推动农牧业的发展和迎接“十三五”规划明确的无抗奶、无药奶的要求，可缩短奶牛乳房炎治疗病程，提高治疗效果，减少奶牛业经济损失。该研究依据中兽药辩证论治，参照中兽医经典方剂，拟定以蒲公英为君药，川芎、当归、漏芦为臣药，连翘、路路通、黄芩、白术、王不留行为佐药，乳香、没药、皂刺为使药的中药复方散剂。中药复方散剂有相同的有效成分、性味归经、功能主治，有效成分比传统中药制剂高若干倍，药性强，药效作用迅速[4]。笔者以化瘀止痛、消肿通乳为宗旨，通过正交试验筛选较适宜的粉碎时间和混合比例，采用薄层色谱法（TLC）建立本草乳炎清散有效成分的检测方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试材。
蒲公英、皂刺、漏芦、当归、路路通、连翘、川芎、乳香、没药、黄芩、白术、王不留行，以上12味药均为规范加工炮制的标准药材饮片，且均符合《中华人民共和国兽药典》2010年版第二部标准规定[5]。由内蒙古蒙吉药业科技有限责任公司提供。
1.1.2 试剂。
甲酸、甲醇、乙酸乙酯，天津市恒兴化学试剂制造有限公司生产；醋酸丁酯、环已烷、丁酮、乙醚、乙醇、正已烷，天津市科密欧化学试剂有限公司生产。
1.1.3 对照品。
咖啡酸对照品（批号110885-200102，中国食品药品检定研究院）；漏芦对照药材（批号1209120-201511，中国食品药品检定研究院）；当归对照药材（批号z0101005，中国食品药品检定研究院）；川芎对照药材（批号120918-201411，中国食品药品检定研究院）。
1.1.4 仪器。
电子分析天平（型号BT25S，天津泰斯特仪器有限公司）；pH计（型号PHS-3C，上海仪电科学仪器股份有限公司）；数字恒温水浴锅（型号HH-4，江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司）；三用紫外分析仪（型号ZF-1，上海宝山顾村电光仪器厂）；流水式粉碎机（型号DX-25，广州市大祥电子机械设备有限公司）。
1.2 方法
1.2.1 中草药选择。 该组方以蒲公英为君药，川芎、当归、漏芦为臣药，另含有连翘、路路通、乳香、没药、皂刺、黄芩、白术、王不留行，各中草药功效见表1。
1.2.2 工艺制备。
1.2.2.1 中草药组方。
蒲公英 30 g、连翘 20 g、黄芩 20 g、王不留行 30 g、路路通 20 g、漏芦 10 g、当归 20 g、川芎 10 g、白术 10 g、乳香 10 g、没药 10 g、皂刺 10 g，按处方称取12味中药，粉碎，混匀，分装，密封，即得。
1.2.2.2 单独粉碎。
分别称取蒲公英 30 g、连翘 20 g、黄芩 20 g、王不留行 30 g、路路通 20 g、漏芦 10 g、当归 20 g、川芎 10 g、白术 10 g、乳香 10 g、没药 10 g、皂刺 10 g，单独粉碎，取出，检视。
1.2.2.3 全混粉碎。
分别称取蒲公英 30 g、连翘 20 g、黄芩 20 g、王不留行 30 g、路路通 20 g、漏芦 10 g、当归 20 g、川芎 10 g、白术 10 g、乳香 10 g、没药 10 g、皂刺 10 g，混合粉碎，取出，检视。
1.2.2.4 正交试验。
根据“1.2.2.2”及“1.2.2.3”的试验结果，将12味中药按粉碎情况分4组，分别为蒲公英、连翘、乳香；黄芩、路路通、王不留行；漏芦、当归、川芎；白术、皂刺、没药。选取粉碎时间（A）、混合比例（B）2个因素，每个因素选择3个水平，其中因素A为粉碎時间35、45、50 min，因素B为混合比例1.0∶1.0∶0.2、1.0∶1.0∶0.4、1.0∶1.0∶0.6，设计正交试验，以外观均匀度、粉末细度和出粉率为考察指标，确定本草乳炎清散最优的制备工艺。
1.2.3 有效成分薄层色谱检测方法。
1.2.3.1 蒲公英的薄层鉴别。
取本品粉末5 g，加5%甲酸的甲醇溶液20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提出2次，每次10 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取咖啡酸对照品，加甲醇制成0.5 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各6 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（7.0∶2.5∶2.5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视[6]。
1.2.3.2 漏芦的薄层鉴别。
取本品粉末6 g，加甲醇20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取漏芦对照药材1 g，加甲醇20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为对照药材溶液。
吸取上述2种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-丁酮（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视[6]。
1.2.3.3 当归的薄层鉴别。
取本品粉末5 g，加乙醚20 mL，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5 g，加乙醚20 mL，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。吸取上述2种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷-乙酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下（365 nm）下检视[6]。
1.2.3.4 川芎的薄层鉴别。
取本品粉末5 g，加乙醚20 mL，加热回流1 h，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2 mL使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材1 g，加乙醚20 mL，加热回流1 h，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2 mL使溶解，作为对照药材溶液。吸取上述2种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正已烷-乙酸乙酯（3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视[6]。
2 结果与分析
2.1 工艺研究
2.1.1 单独粉碎。
其中蒲公英、皂刺、漏芦、当归、路路通、连翘、川芎、黄芩、王不留行、白术10味中药均可单独粉碎，但乳香和没药粉碎不完全，损耗较大。
2.1.2 全混粉碎。
12味中药全部粉碎，损耗较大，出粉率较低。
2.1.3 正交试验。
由表2可知，各因素对粉碎效率的影响主次顺序为A、B，即粉碎时间影响较大，其次是混合比例；该组方最佳制备工艺为A2B2，即粉碎时间为45 min，以1.0∶1.0∶0.4为混合比例；方差分析结果表明，粉碎时间和混合比例对工艺制备效果具有显著的影响。
2.2 有效成分薄层色谱检测 由图1可知，供试品色谱中，蒲公英、漏芦、当归、川芎均在与对照品色谱相应的位置上出现相同颜色的荧光斑点。
3 讨论与结论
单独粉碎与混合粉碎是现代散剂制备的主流方法[7]。在该试验制备工艺中，单独和全混粉碎发现乳香、没药不能完全粉碎，损耗较大，导致药效有所降低。冯崇华[8]将乳香、没药放冷制成小块后再粉碎成适宜调剂的制品。该试验将组方中乳香、没药放冰箱冷冻适宜时间，按一定比例混合粉碎，由正交试验分析可知，混合时间对粉碎工艺效果影响较大，其次是粉碎比例；有效解决了乳香、没药黏冲导致的不能完全粉碎的问题，确定了最佳的粉碎混合工艺。
含挥发油较高的、加热后容易失效的、难溶的药物适合做成散剂，其有效成分的变化最终影响药物的临床疗效。本草乳炎清散主要用于治疗奶牛乳房炎，具有化瘀止痛、消肿通乳的功能，咖啡酸为方中君药蒲公英的主要成分，具有抗菌、抗氧化、抗炎以及抗癌等作用[9]；漏芦具有清热解毒、活血通乳的功效；當归具有抑菌、抗动脉硬化作用；川芎具有活血化瘀、抗炎、抗血小板聚集等药理作用[10]。因此，该研究中考察的蒲公英、漏芦、当归和川芎均为本草乳炎清散中治疗奶牛乳房炎的主要有效成分，且含量较高。
该研究通过正交试验确定12味中药的最佳制备工艺为A2B2，即取处方量的蒲公英、连翘、乳香；黄芩、路路通、王不留行；漏芦、当归、川芎；白术、皂刺、没药，且以最佳粉碎时间45 min，分别将4组以每组1.0∶1.0∶0.4的混合比例放置粉碎机内粉碎，混合。本草乳炎清散工艺的研究为其规模生产及临床应用奠定了基础。
参考文献
[1] 张官祥.奶牛乳房炎引发的经济损失[J].农业技术与装备，2009（7）：32-33.
[2] 王金君，辛萍萍，孙黎明，等.中药组方治疗奶牛乳房炎效果研究[J].现代畜牧科技，2016（5）：1-2，4.
[3] 韩飞，幸仁汇，陈琳琦，等.中药抗细菌耐药性的研究进展[J].中国中药杂志，2016，41（5）：813-817.
[4] 邵进明，梁光义.中药复方研究方法综述[J].贵阳中医学院学报，2007，29（4）：56-57.
[5] 中国兽药药典委员会.中华人民共和国兽药典：二部[S].北京：中国农业出版社，2011.
[6] 孟超，张鹏飞，杨建龙，等.消炎镇痛散质量标准的建立及部分药效学研究[J].中央民族大学学报（自然科学版），2016，25（2）：71-76.
[7] 张定堃，杨明，林俊芝，等.中药散剂的制法研究[J].中华中医药杂志，2014（1）：21-24.
[8] 冯崇华.制乳香、没药粉碎方法的改进[J].中成药，1994（9）：55.
[9] 刘明江，宋世秀，蒋小玉，等.咖啡酸抗LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤的调节机制[C]//中国畜牧兽医学会2013年学术年会论文集.北京：中国畜牧兽医学会，2013.
[10] 金玉青，洪远林，李建蕊，等.川芎的化学成分及药理作用研究进展[J].中药与临床，2013，4（3）：44-48.
关键词 本草乳炎清散；奶牛乳房炎；工艺制备；正交试验；薄层色谱法
中图分类号 R28 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）03-0154-03
Abstract[Objective] To study the technology of traditional Chinese medicine in the treatment of mastitis in dairy cows. [Method] Orthogonal test was conducted to screen out suitable grinding time and mixing ratio；TLC method was adopted to establish detection method for effective components in new medicines. [Result] The optimal preparation conditions were crushing time 45 min， mixing ratio 1.0∶1.0∶0.4；TLC identification results of Taraxacum mongolicum， Rhapontisum unflorum， Angelica sinensis， Ligusticum wallichii were determined. Fluorescent spots of the same color appeared in the corresponding position of the control product chromatography. [Conclusion] Optimal grinding time and mixing ratio is a safety and effective method for prescription preparation. Established test items can be used for quality control of effective constituents.
Key words Herbal breast inflammation powder；Cow mastitis；Prescription preparation；Orthogonal test；TLC
奶牛乳房炎是由于細菌感染或機械性损伤造成的，引起奶牛一系列病症，并造成牛奶品质下降的奶牛常见病症。目前，全世界约有2.2亿头奶牛，其中约有1/3左右的奶牛患有各种类型的乳房炎[1]。而在奶牛养殖过程中，治疗奶牛乳房炎通常选择西药治疗，即抗生素疗法，虽然其治疗见效快，但因牛奶中容易出现药物残留，导致牛奶品质下降，造成经济损失[2]。
本草乳炎清散是针对奶牛乳房炎开发的新型的中草药制剂，该制剂尚未在国内外市场上市销售。由纯中药组成，成本低廉，使用方便，不易产生耐药性，毒副作用小，不含任何添加剂，绿色无残留[3]，符合自治区创新型计划，推动农牧业的发展和迎接“十三五”规划明确的无抗奶、无药奶的要求，可缩短奶牛乳房炎治疗病程，提高治疗效果，减少奶牛业经济损失。该研究依据中兽药辩证论治，参照中兽医经典方剂，拟定以蒲公英为君药，川芎、当归、漏芦为臣药，连翘、路路通、黄芩、白术、王不留行为佐药，乳香、没药、皂刺为使药的中药复方散剂。中药复方散剂有相同的有效成分、性味归经、功能主治，有效成分比传统中药制剂高若干倍，药性强，药效作用迅速[4]。笔者以化瘀止痛、消肿通乳为宗旨，通过正交试验筛选较适宜的粉碎时间和混合比例，采用薄层色谱法（TLC）建立本草乳炎清散有效成分的检测方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试材。
蒲公英、皂刺、漏芦、当归、路路通、连翘、川芎、乳香、没药、黄芩、白术、王不留行，以上12味药均为规范加工炮制的标准药材饮片，且均符合《中华人民共和国兽药典》2010年版第二部标准规定[5]。由内蒙古蒙吉药业科技有限责任公司提供。
1.1.2 试剂。
甲酸、甲醇、乙酸乙酯，天津市恒兴化学试剂制造有限公司生产；醋酸丁酯、环已烷、丁酮、乙醚、乙醇、正已烷，天津市科密欧化学试剂有限公司生产。
1.1.3 对照品。
咖啡酸对照品（批号110885-200102，中国食品药品检定研究院）；漏芦对照药材（批号1209120-201511，中国食品药品检定研究院）；当归对照药材（批号z0101005，中国食品药品检定研究院）；川芎对照药材（批号120918-201411，中国食品药品检定研究院）。
1.1.4 仪器。
电子分析天平（型号BT25S，天津泰斯特仪器有限公司）；pH计（型号PHS-3C，上海仪电科学仪器股份有限公司）；数字恒温水浴锅（型号HH-4，江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司）；三用紫外分析仪（型号ZF-1，上海宝山顾村电光仪器厂）；流水式粉碎机（型号DX-25，广州市大祥电子机械设备有限公司）。
1.2 方法
1.2.1 中草药选择。 该组方以蒲公英为君药，川芎、当归、漏芦为臣药，另含有连翘、路路通、乳香、没药、皂刺、黄芩、白术、王不留行，各中草药功效见表1。
1.2.2 工艺制备。
1.2.2.1 中草药组方。
蒲公英 30 g、连翘 20 g、黄芩 20 g、王不留行 30 g、路路通 20 g、漏芦 10 g、当归 20 g、川芎 10 g、白术 10 g、乳香 10 g、没药 10 g、皂刺 10 g，按处方称取12味中药，粉碎，混匀，分装，密封，即得。
1.2.2.2 单独粉碎。
分别称取蒲公英 30 g、连翘 20 g、黄芩 20 g、王不留行 30 g、路路通 20 g、漏芦 10 g、当归 20 g、川芎 10 g、白术 10 g、乳香 10 g、没药 10 g、皂刺 10 g，单独粉碎，取出，检视。
1.2.2.3 全混粉碎。
分别称取蒲公英 30 g、连翘 20 g、黄芩 20 g、王不留行 30 g、路路通 20 g、漏芦 10 g、当归 20 g、川芎 10 g、白术 10 g、乳香 10 g、没药 10 g、皂刺 10 g，混合粉碎，取出，检视。
1.2.2.4 正交试验。
根据“1.2.2.2”及“1.2.2.3”的试验结果，将12味中药按粉碎情况分4组，分别为蒲公英、连翘、乳香；黄芩、路路通、王不留行；漏芦、当归、川芎；白术、皂刺、没药。选取粉碎时间（A）、混合比例（B）2个因素，每个因素选择3个水平，其中因素A为粉碎時间35、45、50 min，因素B为混合比例1.0∶1.0∶0.2、1.0∶1.0∶0.4、1.0∶1.0∶0.6，设计正交试验，以外观均匀度、粉末细度和出粉率为考察指标，确定本草乳炎清散最优的制备工艺。
1.2.3 有效成分薄层色谱检测方法。
1.2.3.1 蒲公英的薄层鉴别。
取本品粉末5 g，加5%甲酸的甲醇溶液20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提出2次，每次10 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取咖啡酸对照品，加甲醇制成0.5 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各6 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（7.0∶2.5∶2.5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视[6]。
1.2.3.2 漏芦的薄层鉴别。
取本品粉末6 g，加甲醇20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取漏芦对照药材1 g，加甲醇20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为对照药材溶液。
吸取上述2种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-丁酮（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视[6]。
1.2.3.3 当归的薄层鉴别。
取本品粉末5 g，加乙醚20 mL，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材0.5 g，加乙醚20 mL，超声处理10 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。吸取上述2种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正已烷-乙酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下（365 nm）下检视[6]。
1.2.3.4 川芎的薄层鉴别。
取本品粉末5 g，加乙醚20 mL，加热回流1 h，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2 mL使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材1 g，加乙醚20 mL，加热回流1 h，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯2 mL使溶解，作为对照药材溶液。吸取上述2种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正已烷-乙酸乙酯（3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视[6]。
2 结果与分析
2.1 工艺研究
2.1.1 单独粉碎。
其中蒲公英、皂刺、漏芦、当归、路路通、连翘、川芎、黄芩、王不留行、白术10味中药均可单独粉碎，但乳香和没药粉碎不完全，损耗较大。
2.1.2 全混粉碎。
12味中药全部粉碎，损耗较大，出粉率较低。
2.1.3 正交试验。
由表2可知，各因素对粉碎效率的影响主次顺序为A、B，即粉碎时间影响较大，其次是混合比例；该组方最佳制备工艺为A2B2，即粉碎时间为45 min，以1.0∶1.0∶0.4为混合比例；方差分析结果表明，粉碎时间和混合比例对工艺制备效果具有显著的影响。
2.2 有效成分薄层色谱检测 由图1可知，供试品色谱中，蒲公英、漏芦、当归、川芎均在与对照品色谱相应的位置上出现相同颜色的荧光斑点。
3 讨论与结论
单独粉碎与混合粉碎是现代散剂制备的主流方法[7]。在该试验制备工艺中，单独和全混粉碎发现乳香、没药不能完全粉碎，损耗较大，导致药效有所降低。冯崇华[8]将乳香、没药放冷制成小块后再粉碎成适宜调剂的制品。该试验将组方中乳香、没药放冰箱冷冻适宜时间，按一定比例混合粉碎，由正交试验分析可知，混合时间对粉碎工艺效果影响较大，其次是粉碎比例；有效解决了乳香、没药黏冲导致的不能完全粉碎的问题，确定了最佳的粉碎混合工艺。
含挥发油较高的、加热后容易失效的、难溶的药物适合做成散剂，其有效成分的变化最终影响药物的临床疗效。本草乳炎清散主要用于治疗奶牛乳房炎，具有化瘀止痛、消肿通乳的功能，咖啡酸为方中君药蒲公英的主要成分，具有抗菌、抗氧化、抗炎以及抗癌等作用[9]；漏芦具有清热解毒、活血通乳的功效；當归具有抑菌、抗动脉硬化作用；川芎具有活血化瘀、抗炎、抗血小板聚集等药理作用[10]。因此，该研究中考察的蒲公英、漏芦、当归和川芎均为本草乳炎清散中治疗奶牛乳房炎的主要有效成分，且含量较高。
该研究通过正交试验确定12味中药的最佳制备工艺为A2B2，即取处方量的蒲公英、连翘、乳香；黄芩、路路通、王不留行；漏芦、当归、川芎；白术、皂刺、没药，且以最佳粉碎时间45 min，分别将4组以每组1.0∶1.0∶0.4的混合比例放置粉碎机内粉碎，混合。本草乳炎清散工艺的研究为其规模生产及临床应用奠定了基础。
参考文献
[1] 张官祥.奶牛乳房炎引发的经济损失[J].农业技术与装备，2009（7）：32-33.
[2] 王金君，辛萍萍，孙黎明，等.中药组方治疗奶牛乳房炎效果研究[J].现代畜牧科技，2016（5）：1-2，4.
[3] 韩飞，幸仁汇，陈琳琦，等.中药抗细菌耐药性的研究进展[J].中国中药杂志，2016，41（5）：813-817.
[4] 邵进明，梁光义.中药复方研究方法综述[J].贵阳中医学院学报，2007，29（4）：56-57.
[5] 中国兽药药典委员会.中华人民共和国兽药典：二部[S].北京：中国农业出版社，2011.
[6] 孟超，张鹏飞，杨建龙，等.消炎镇痛散质量标准的建立及部分药效学研究[J].中央民族大学学报（自然科学版），2016，25（2）：71-76.
[7] 张定堃，杨明，林俊芝，等.中药散剂的制法研究[J].中华中医药杂志，2014（1）：21-24.
[8] 冯崇华.制乳香、没药粉碎方法的改进[J].中成药，1994（9）：55.
[9] 刘明江，宋世秀，蒋小玉，等.咖啡酸抗LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤的调节机制[C]//中国畜牧兽医学会2013年学术年会论文集.北京：中国畜牧兽医学会，2013.
[10] 金玉青，洪远林，李建蕊，等.川芎的化学成分及药理作用研究进展[J].中药与临床，2013，4（3）：44-48.