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目的
摸索一套泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型的多重聚合酶链反应法。
方法选择某一型与其它各型均不同的可变区部位作为下游引物,以恒定区1区的高度保守区作为各型的公用上游引物,优化反应条件,进行标准株和临床野生株的多重聚合酶链反应扩增,并与聚合酶链反应-限制性内切酶片段多态性方法比较。
结果用摸索出的反应系统和条件,对8个标准株进行扩增,扩增出与理论值一致的片段,并可直接在普通水平琼脂糖凝胶进行电泳。特异性检测证明:①衣原体各型之间没有非特异性交叉扩增,②对泌尿生殖道病原和寄生微生物进行扩增,未扩出任何DNA带。对临床野生株分型结果证明:复合聚合酶链反应阳性率为100%,而聚合酶链反应-限制性内切酶片段多态性为94.44%。
结论本套衣原体基因分型的多重聚合酶链反应法特异、敏感、快速、实用,最终能用于临床分型。