禽呼肠孤病毒σNS和σC基因shRNA载体构建及其干扰效果测定

来源 :西南农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ait123123

【摘要】

：

禽呼肠孤病毒σC基因是病毒粘附蛋白,σNS基因具有结合单链RNA活性。根据siRNA靶序列设计原则,设计并合成siRNA模板并克隆到shRNA表达载体pSilencer-CMV 4.1 neo。分别构建了

【作者】

：

熊文婕谢芝勋刘加波庞耀姗谢志勤邓显文谢丽基

【机构】

：

防城港市动物疫病预防控制中心,广西壮族自治区兽医研究所

【出处】

：

西南农业学报

【发表日期】

：

2012年2期

【关键词】

：

禽呼肠孤病毒 SHRNA 干扰 Avian reovirus shRNA（short hairpin RNA） Interference

【基金项目】

：

国家百千万人才工程入选专项资金项目（945200603）, 广西特聘专家专项经费（2011B020）, 广西自然科学基金项目（桂科自0991222）, 广西留学回国人员基金项目（桂科回0639016）

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禽呼肠孤病毒σC基因是病毒粘附蛋白,σNS基因具有结合单链RNA活性。根据siRNA靶序列设计原则,设计并合成siRNA模板并克隆到shRNA表达载体pSilencer-CMV 4.1 neo。分别构建了针对σC基因的shRNA载体C1、C2、C3和针对σNS基因的shRNA载体NS1、NS2、NS3。将构建的shRNA载体和阴性对照分别与表达σC和σNS基因的融合蛋白的真核表达载体pEGFP-σC及pEGFP-σNS共转染DF-1细胞。荧光显微镜观察结果表明,6个shRNA片段不同程度地抑制各自融合蛋白

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