【摘 要】
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黑曲霉M00988菌株具有降解赭曲霉毒素A(OTA)的作用。为了提高天然菌株的降解效率,将黑曲霉菌株中解毒的关键羧肽酶cp基因进行克隆,并原核重组表达该酶。通过优化得到最优的表
【机 构】
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北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心,北京工商大学北京市风味化学重点实验室,北京工商大学北京市质量与安全重点实验室
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2017YFC1600605),北京自然科学基金项目(6172003),国家自然科学基金项目(31601408).
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黑曲霉M00988菌株具有降解赭曲霉毒素A(OTA)的作用。为了提高天然菌株的降解效率,将黑曲霉菌株中解毒的关键羧肽酶cp基因进行克隆,并原核重组表达该酶。通过优化得到最优的表达条件为培养2.5 h后加入1 mmol/L IPTG,诱导温度28℃,诱导时间20 h。粗酶液经镍柱纯化后得到解毒能力达30.03μg/mg的电泳级重组羧肽酶。之后,采用AB-8大孔树脂作为吸附载体,戊二醛为交联剂对酶进行复合固定化,得到最优固定化条件为吸附时间12 h、吸附温度37℃、戊二醛质量分数0.35%、交联时间1 h、交
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