猪戊型肝炎病毒基因ORF2片段AG02的融合表达及间接ELISA方法的初步建立

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yingchali

【摘要】

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采用巢式RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒（SHEV）结构蛋白基因ORF2部分片段AG02。将该片段插入pET32a表达载体，命名为PET-HEV，将重组表达质粒转化大肠杆菌B121（DE-3），经1mmol／L IPTG诱导

【作者】

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张可心赵敏郭巍于敏赵宇军相文华

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,东北林业大学生命科学学院

【出处】

：

中国生物工程杂志

【发表日期】

：

2006年8期

【关键词】

：

戊型肝炎病毒 ORF2片段原核表达间接ELISA HEV ORF2 Pronucleus expression Indirected ELISA

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采用巢式RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒（SHEV）结构蛋白基因ORF2部分片段AG02。将该片段插入pET32a表达载体，命名为PET-HEV，将重组表达质粒转化大肠杆菌B121（DE-3），经1mmol／L IPTG诱导得到表达，进行SDS-PAGE分析，证明该片段得到融合表达，分子量为33kDa。Western blot分析表明，重组蛋白可以与HEV阳性血清反应，表明该蛋白具有良好的抗原性。以纯化的重组蛋白建立了初步的间接ELISA方法，经方阵滴定确定最佳包被浓度为2．43μg／nll，血清最佳的

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