【摘 要】
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目的在E.coli BL21（DE3）中表达5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）,并检测MTHFR的表达情况及L-5-甲基四氢叶酸的增加量。方法采用PCR法获得MTHFR基因（metF）全长DNA,分别在其5＇端和3＇端
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目的在E.coli BL21（DE3）中表达5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）,并检测MTHFR的表达情况及L-5-甲基四氢叶酸的增加量。方法采用PCR法获得MTHFR基因（metF）全长DNA,分别在其5＇端和3＇端加上BamHⅠ和SacⅠ酶切位点。经BamHⅠ和SacⅠ双酶切后,连接到经同样双酶切的表达载体pET-28a（＋）中,经限制性酶切、菌落PCR和测序验证正确后,转化至E.coli BL21（DE3）,经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测MTHFR表达量,HPLC检测L-
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