miR-140通过下调Smad3表达抑制结肠癌细胞迁移和侵袭能力

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目的

Western blot结果显示,上调miR-140后,miR-140组中Smad3蛋白的相对表达水平为0.04±0.01,低于空白对照组(0.47±0.02)和阴性对照组(0.52±0.06,均P<0.05)。real-time PCR检测结果显示,miR-140组中Smad3 mRNA表达水平为1.11±0.13,与阴性对照组(1.00±0.06)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。细胞划痕实验显示,miR-140转染细胞的迁移能力均低于空白对照组和阴性对照组,而与Smad3 siRNA组比较,迁移能力无明显改变。Transwell小室迁移实验显示,miR-140组的穿膜细胞数为76.2±4.4,低于空白对照组(267.1±4.9)和阴性对照组(336.1±5.7,均P<0.05),而与Smad3 siRNA组(83.5±7.3)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell小室侵袭实验显示,miR-140组的穿膜细胞数为109.5±7.4,低于空白对照组(403.1±5.1)和阴性对照组(392.6±8.4,均P<0.05);而与Smad3 siRNA组(138.8±3.6)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-140下调可使Smad3蛋白表达增高,部分逆转miR-140对细胞迁移和侵袭能力的抑制作用。miR-140抑制剂和Smad3 siRNA共转染则对Smad3蛋白表达和细胞的迁移和侵袭能力无明显影响。

结论

miR-140在转录后水平调控Smad3的表达。miR-140抑制结肠癌细胞迁移和侵袭能力,可能是通过下调Smad3来实现。miR-140 可能作为肿瘤转移诊断及治疗的潜在候选靶点。

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