【摘 要】
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为探讨RNF125在调控caspase-1中的功能及作用机制，利用免疫共沉淀、GST pull-down和免疫荧光等技术证明RNF125和caspase-1 p33亚基之间的相互作用；分析RNF125对p33亚基泛素化修饰的方式；通过siRNA技术降低THP-1细胞中RNF125的表达，检测RNF125敲低前后细胞受LPS+ATP刺激时IL-1β的分泌情况；以腹腔注射叶酸的方式构建RNF125+/
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（31872715）； 中国博士后科学基金资助项目（2020M683743）；
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为探讨RNF125在调控caspase-1中的功能及作用机制，利用免疫共沉淀、GST pull-down和免疫荧光等技术证明RNF125和caspase-1 p33亚基之间的相互作用；分析RNF125对p33亚基泛素化修饰的方式；通过siRNA技术降低THP-1细胞中RNF125的表达，检测RNF125敲低前后细胞受LPS+ATP刺激时IL-1β的分泌情况；以腹腔注射叶酸的方式构建RNF125+/+和RNF125-/-小鼠的肾炎模型，分析血清中尿素水平，称量小鼠体重和肾脏重量并计算肾重比.结果显示，RNF125可与caspase-1 p33亚基直接相互作用，且RNF125抑制了caspase-1 p33亚基的K48聚泛素化修饰；与对照组相比，敲低RNF125表达的THP-1细胞在受到LPS+ATP刺激时，分泌的IL-1β显著减少；肾炎模型的结果显示，RNF125敲除型小鼠的肾脏肿胀不明显，尿素水平和肾重比均显著低于野生型小鼠.该研究首次发现了E3泛素连接酶RNF125与caspase-1活性亚基p33之间的相互作用，并证明它可通过影响caspase-1 p33亚基的泛素化修饰促进炎症反应的信号传导.
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