5’-非转录区序列改建提高毕赤酵母表达抗菌肽LL-37

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cangxialong

【摘要】

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目的：探讨5’-非转录区（5＇-UTR）序列改建对毕赤酵母表达外源蛋白LL-37的影响。方法：去除毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9 5＇-UTR内GGATCCAA序列，转化E．coli DH5α，构建改良的毕赤酵母分泌表

【作者】

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陆建荣王惠民吴萍黄松平常秋月凌勇武倪晓蓉

【机构】

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南通市第三人民医院感染病实验室,南通大学附属医院检验科,南通市中心血站

【出处】

：

第二军医大学学报

【发表日期】

：

2007年12期

【关键词】

：

抗菌肽LL-37 毕赤酵母 5'-非转录区 antimicrobial peptide LL-37 Pichia pastoris 5＇-untra

【基金项目】

：

江苏省南通市科学技术委员会资助项目（S40032）.本实验得到南通大学微生物与免疫学实验室沈爱国教授等的热情指导和帮助,中国科学院上海生物化学研究所张倩也给予了技术支持,在此一并表示感谢!

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目的：探讨5’-非转录区（5＇-UTR）序列改建对毕赤酵母表达外源蛋白LL-37的影响。方法：去除毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9 5＇-UTR内GGATCCAA序列，转化E．coli DH5α，构建改良的毕赤酵母分泌表达载体pPIC9-EDIT；PCR鉴定及测序确认后与酵母偏爱密码子编码的LL-37基因片段连接，构建改良的重组表达载体pPIC9-EDIT-LL-37；原生质球法转化毕赤酵母GS115，PCR扩增鉴定后诱导LL-37表达，筛选最佳表达条件，对表达产物进行凝胶电泳和Western印迹分析；比较

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