【摘 要】
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应用PCR技术分别扩增出编码白喉毒素氨基端389个氨基酸(DT389)的基因片段及人IL-2全基因,将两基因串连插入pET3a载体,构建成含有DT389-IL-2融合基因的表达载体,转化大肠杆菌BL21,经
【机 构】
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中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052,东南大学生物医学工程系
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应用PCR技术分别扩增出编码白喉毒素氨基端389个氨基酸(DT389)的基因片段及人IL-2全基因,将两基因串连插入pET3a载体,构建成含有DT389-IL-2融合基因的表达载体,转化大肠杆菌BL21,经表达、纯化后,用3H-Leucine掺入法测定其对HUT102细胞的蛋白合成抑制作用。SDS-PAGE电泳分析表明,表达产物分子质量(Mr)约为58kD;重组嵌合毒素能够特异性地抑制高表达IL-2受体的HUT102细胞的蛋白生物合成,且有一定的剂量反应关系,其细胞半数抑制浓度(IC50)约为3.3
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