【摘 要】
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目的 研究维生素K3(VK3)对人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的影响并探讨其凋亡机制.方法 用人肝癌细胞株SMMC-7721进行传代培养.CCK-8法检测VK3对SMMC-7721细胞的抑制作用.使用Hoechst33342荧光染色法观察凋亡细胞核的形态.细胞周期(PI法)、细胞凋亡(Annexin V/PI法)和细胞膜表面Fas表达量使用流式细胞仪进行检测.Fas mRNA的检测采用逆转录R
【机 构】
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325000温州医学院附属第一医院检验科,325000温州医学院附属第一医院检验科,325000温州医学院附属第一医院检验科,325000温州医学院附属第一医院检验科,325000温州医学院附属第一医
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目的 研究维生素K3(VK3)对人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的影响并探讨其凋亡机制.方法 用人肝癌细胞株SMMC-7721进行传代培养.CCK-8法检测VK3对SMMC-7721细胞的抑制作用.使用Hoechst33342荧光染色法观察凋亡细胞核的形态.细胞周期(PI法)、细胞凋亡(Annexin V/PI法)和细胞膜表面Fas表达量使用流式细胞仪进行检测.Fas mRNA的检测采用逆转录RT-PCR法.细胞培养上清液的可溶性Fas配体(sFasL)水平采用ELISA法检测.结果 不同浓度VK3(2、5、10、20、25umol/L)作用SMMC-7721细胞48 h后,细胞生长抑制率分别为33.8%,50.1%,63.9%,78.5%和84.7%;细胞周期研究发现G0/G1期细胞增加,S期细胞减少;细胞的早期凋亡率分别为18.75%,25.80%,38.80%,29.92%和26.18%;Hoechst33342荧光染色法发现凋亡细胞核呈致密浓染;在VK3浓度低于10 umol/L,SMMC-7721细胞膜表面Fas平均荧光强度和细胞内Fas mRNA表达及培养上清液sFasL水平均逐渐升高,而在高浓度组其结果均又下降.结论 VK3能抑制SMMC-7721细胞增殖并诱导其发生凋亡,而Fas及sFasL的表达水平与VK3诱导SMMC-7721细胞的凋亡密切相关。
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