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目的 构建内质网滞留型的抗CyclinD1胞内抗体并鉴定其在肿瘤细胞中的表达活性。方法 利用PCR技术将细胞内质网滞留信号及E-tag检测标签引入抗CyclinD1人源单链抗体，获得抗CyclinD1胞内抗体（AD5E）基因片段，通过分子克隆技术，构建重组真核表达载体pcDNA3．1-AD5E，限制性内切酶分析及DNA测序验证其序列及读码框正确后，利用脂质体介导法转染HeLa细胞，RT-PCR和间接免疫荧光实验分析该胞内抗体在肿瘤细胞中的表达活性。结果 限制性内切酶分析及DNA测序发现，正确引入细胞内质网