三重荧光PCR法鉴定食品中牛、猪、鸭3种动物源性成分

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旨在建立一种快速、灵敏、可以同时鉴定食品中多种动物源性成分的方法。根据线粒体环氧酶3(cox3)、细胞色素b(cytb)和线粒体d-loop,分别设计鸭、牛和猪特异性引物序列。应用SYBR实时荧光PCR技术,分析熔解曲线,根据出峰位置的不同,定性识别鸭、牛、猪源成分。单重PCR试验测得鸭、牛和猪PCR扩增产物熔解曲线峰值对应的熔解温度分别为(83.5±0.5)℃、(79.5±0.5)℃和(76.5±0.5)℃。三重PCR体系扩增产物的吸收峰与单重PCR体系扩增产物的吸收峰对应的熔解温度吻合,说明试验的可行性。此外,试验检测鸭成分的灵敏度为0.1%,牛成分的为0.1%,猪成分的为1%。结果表明,该方法成本较低、灵敏度较高,可用于同时定性检测食品中鸭、牛和猪3种动物源性成分。
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