【摘 要】
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目的使用TRIzol法提取RNA,分析在不同种类、不同浓度试剂残留时RNA的吸光度及曲线变化,以阐明影响RNA纯度的因素。方法使用TRIzol试剂提取杜氏盐藻中RNA,经酚、氯仿、异戊醇
【机 构】
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新乡医学院三全学院基础医学院,新乡医学院生命科学技术学院合成生物学改造工程与应用实验室,新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:30970055);河南省科技厅自然科学基金资助项目(编号:122102310194);新乡医学院培育基金资助项目(编号:ZD200936,2014ZD109);新乡医学院博士基金资助项目(编号:XYBSKYZZ201624)
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目的使用TRIzol法提取RNA,分析在不同种类、不同浓度试剂残留时RNA的吸光度及曲线变化,以阐明影响RNA纯度的因素。方法使用TRIzol试剂提取杜氏盐藻中RNA,经酚、氯仿、异戊醇抽提,醋酸钠和乙醇沉淀、纯化后制成标准品,与不同浓度的酚、TRIzol、氯仿、乙醇、牛血清白蛋白(BSA)等量混匀后制成待测定溶液,使用Nano Drop 2000测定其在230、260、280 nm处的吸光度,计算比值并观察其吸收曲线。结果在不同浓度的酚和TRIzol及0.5 g·L-1BSA残留时,RNA的吸光度比值与吸收曲线均有较明显的变化;高浓度的氯仿残留时其吸光度与吸收曲线的变化较低浓度的变化明显;高浓度的乙醇残留对RNA溶液的吸光度及曲线影响较小,而低浓度的残留反而有较大影响。结论根据RNA溶液的吸光度比值及曲线共同分析可快速准确判断影响RNA质量的残留试剂。
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