【摘 要】
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目的:建立一种检测次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)活性的高效液相色谱法,并检测患者红细胞中HGPRT活性.方法:在5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)条件下,HGPRT催化次黄嘌呤生
【机 构】
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南方医科大学,广州,510515;广州军区武汉总医院临床药理科
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目的:建立一种检测次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)活性的高效液相色谱法,并检测患者红细胞中HGPRT活性.方法:在5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)条件下,HGPRT催化次黄嘌呤生成次黄嘌呤核苷酸(IMP),高氯酸沉淀蛋白后进行高效液相色谱法分析.采用Hypersil ODS C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)柱;流动相为磷酸氢盐缓冲液-乙腈(99.6∶0.4),流速1 ml·min-1,在262 nm处检测IMP.应用新建立的高效液相色谱法测定68例服用过硫唑嘌呤的肾移植患者红细胞中HGPRT活性.结果:在该条件下,测得的线性范围是20~600 μmol·L-1,检测限是20 μmol·L-1,其日间和日内精密度均小于5%,方法回收率和提取回收率分别在100.81%~101.91%和99.05%~101.40%范围内.65例患者红细胞HGPRT活性范围为44.59~123.86 U,平均(87.83±21.55)U.结论:该法操作简便、灵敏度高、重复性好,适用于临床常规检测.
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