人主动脉内皮细胞培养方法

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shashuang0126
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本文取急死成人的主动脉进行分离培养,旨在建立人主动脉内皮细胞体外培养系统,研究内皮细胞的生物学特性,肿瘤细胞与内皮细胞的体外粘附、侵袭能力,肿瘤细胞与内皮细胞的异质性。我们在Jafe法的基础上加以改进,建立了人主动脉内皮细胞培养方法。即在无菌条件下取急死男性成人主动脉,用PBS冲净血液、剪去外膜;在大培养皿中铺滴一层0.1%胶原酶消化液,即将内膜面向下,铺在消化液上,消化40min;加RPMI1640完全培养液,终止消化。再用无菌不锈钢药匙轻轻把内膜层刮一遍,使内皮细胞脱落于RPMI1640完全培养液中,移入离心管内离心、弃上清;用RPMI1640完全培养液将沉淀细胞悬浮混匀,调整细胞数量,移入小培养瓶中,置37℃、5%CO2饱和湿度的培养箱中培养,24h后细胞成岛状分布,单层贴壁。传代培养细胞呈多角形,边界清楚,生长活跃,符合血管内皮细胞的生物学特性。培养的细胞用于人癌细胞粘附、侵袭等研究中,得到了较好的实验效果。本方法比Jafe法简化,可一人操作,一般培养室都可进行,方法稳定,有一定的实用价值。
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