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目的
建立液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法测定肌酐校正后尿肌氨酸的含量,用于前列腺癌的诊断和治疗。
方法方法学建立及评价。2014年5月至10月上海交通大学医学院附属新华医院采集36例前列腺癌患者、15例良性前列腺增生患者和76例健康体检者的随机尿各5 ml,以[2H3]-肌氨酸作为同位素内标,使用丹磺酰氯对肌氨酸进行柱前衍生,应用LC-MS/MS技术同时测定肌氨酸和肌酐含量。评价该方法的线性、最低检出限、精密度和回收率,并与酶法比较一致性。
结果使用LC-MS/MS法检测尿肌氨酸特异性高,与同分异构体完全分离亦未见明显干扰因素。肌氨酸线性方程为Y=2.045 6X+0.068 9,R2=0.994;检测限(LOD)为8 ng/ml,定量限(LOQ)为25 ng/ml;批内和批间变异系数(CV)<6%;回收率范围96.8%~105.1%;LC-MS/MS法与酶法结果具有相关性,R2=0.815,P<0.01,平均偏差为-37.1%。
结论成功建立LC-MS/MS测定尿液肌氨酸方法,该方法具有良好的特异性、灵敏度和可重复性,有望在前列腺癌的早期诊断研究中提供可靠的技术平台。(中华检验医学杂志,2015,38:321-324)