【摘 要】
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通过克隆、表达海南原鸡程序性细胞死亡分子10(Programmed cell death 10PDCD10)基因,对其蛋白进行生物信息学分析.采用RT-PCR方法克隆得到海南原鸡PDCD10基因CDS区,将扩增产
【机 构】
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海南大学农学院,海口市动物基因工程重点实验室
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通过克隆、表达海南原鸡程序性细胞死亡分子10(Programmed cell death 10PDCD10)基因,对其蛋白进行生物信息学分析.采用RT-PCR方法克隆得到海南原鸡PDCD10基因CDS区,将扩增产物与原核表达载体pET42a连接,构建pET42a-PDCD10重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析;运用生物信息学软件对所获得基因的核苷酸序列进行分析,并预测其编码蛋白的理化性质及二级结构等.克隆获得了PDCD10639 bp的CDS区核苷酸序列,融合蛋白分子量约为57 ku,生物信息学分析发现,PDCD10CDS区包括1个639 bp的开放读码框,编码212个氨基酸.该蛋白不含信号肽,无跨膜区,二级结构中存在大量α-螺旋.研究结果为进一步开展海南原鸡PDCD10的功能研究奠定了坚实的基础.
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