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以A型流感病毒NP基因为靶标，设计并合成了3对编码发夹状siRNA寡聚核苷酸。将合成的序列互补的寡聚核苷酸退火形成双链，克隆至pSilencer 1．0-U6载体中，并转化DH5a菌株，氨苄抗性筛选阳性菌落，扩大培养后，提取质粒进行酶切鉴定，并进行测序分析。结果显示，酶切后得到预期长度的DNA片段；插入序列插入的位置与设计完全一致，无碱基缺失或突变。表明A型流感病毒NP基因小干涉RNA表达载体构建成功。