【摘 要】
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【目的】研究堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)外分泌蛋白是否具有外毒素和致细胞损伤作用。【方法】将牛肾传代细胞与E.acervulina子孢子共培养2.5 h,更换无血清培养液,
【机 构】
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北京农业职业学院牧医系,北京农学院动物科学技术学院
【基金项目】
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北京农业职业学院院级科研项目(XY-HT-19-03),北京市特色高水平骨干专业群项目-动物医学专业群项目-技术平台与社会服务建设项目(PXM2020-157102-000060)
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【目的】研究堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)外分泌蛋白是否具有外毒素和致细胞损伤作用。【方法】将牛肾传代细胞与E.acervulina子孢子共培养2.5 h,更换无血清培养液,每间隔12 h收集入侵后0~60 h的该时间点前12 h所有培养液并透析浓缩,SDS-PAGE和Western Blot检测,确定E.acervulina的外分泌蛋白,将此蛋白加培养液培养牛肾传代细胞,利用吖啶橙和碘化丙啶染色,判断细胞损伤。【结果】E.acervulina分泌约70 kD的蛋白,12~24 h
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