LY294002与Exendin-4体外诱导人胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞

来源 :重庆医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mantou119119
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目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)抑制剂LY294002与胰升血糖素样肽-1(glucagonlike peptide-1,GLP-1)拟似物Exendin-4体外诱导人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,HESc)分化为成熟胰岛素分泌细胞的影响。方法:利用"五步法"包括:HESc体外培养;拟胚体(embryoid bodies,EBs)形成;筛选巢蛋白阳性细胞;扩增巢蛋白阳性细胞;第5阶段分别加入PI3K抑制剂LY294002为实验组(LY组)和GLP-1拟似物Exendin-4为对照组(Ex组)诱导HESc定向分化。光镜下观察各阶段细胞分化特点,细胞免疫荧光染色鉴定胰岛样细胞特异蛋白表达。结果:C肽、胰高血糖素、生长抑素单染细胞阳性率及胰岛素/生长抑素、胰岛素/C肽双染细胞阳性率Ex组均高于LY组:C肽(85.7±2.1)%vs.(74.5±2.7)%,P=0.005;胰高血糖素(38.1±3.4)%vs.(27.2±2.4)%,P=0.018;生长抑素(75.4±3.7)%vs.(31.3±4.7)%,P=0.000;胰岛素/生长抑素(21.5±2.2)%vs.(3.5±0.9)%,P=0.000;胰岛素/C肽(87.5±2.4)%vs.(76.7±3.1)%,P=0.013。结论:在无血清培养体系下,LY294002较Exendin-4诱导HESc分化的胰岛素分泌细胞更加成熟。
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