论文部分内容阅读
目的:构建携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)和大鼠酪氨酸羟化酶(TH)基因的慢病毒载体,转染大鼠骨髓间充质干细胞(rMSC),观察TH基因的表达。方法:RT-PCR方法获得大鼠TH基因,将其克隆至慢病毒载体。通过瞬时转染法包装出病毒上清,鉴定滴度。感染rMSCs,荧光显微镜下观察EGFP的表达、转染效率,RT-PCR、免疫印迹法分别检测THmRNA和蛋白的表达情况。结果:重组慢病毒载体质粒pNL-TH—IRES2-EGFP经双酶切鉴定正确,所获TH基因经测序后与GenBank报道序列完全一致;生产的病毒浓缩