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摘 要：为优化香菇和杏鲍菇两种食用菌生长的培养基条件，对不同pH值和营养液浓度下菌丝形态和菌落的生长状态进行研究，筛选适宜两种食用菌生长的pH值条件和营养液浓度。结果表明，香菇和杏鲍菇培养液的最适pH值分别为8.0和6.0，最适培养液浓度均为0.6%，在此条件下，菌丝生长速度快，横隔多，锁状联合密集，液泡和细胞核明显。
关键词：香菇；杏鲍菇；培养条件；菌丝形态；菌落
中图分类号：S646 文献标识码：A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2018.09.013
Optimization of Medium pH and Nutrient Solution Concentration of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii
HU Min， DU Baohai， BI Xiaojuan， SUN Meng， LIN Jiaying， MENG Xiangsen
（College of Life Science ， Daqing Normal University， Daqing， Heilongjiang 163712， China）
Abstract： In order to optimize the conditions of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii， the experiment was conducted to study the mycelial morphology and the colony growth in different pH and nutrient solution concentration， selecting the optimal environment for the growth. The results showed that the optimum pH of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii were 8.0 and 6.0 respectively， the optimum nutrient solution concentration were both 0.6%. Compared with the other conditions， the two edible fungi under the optimized condition had faster growth rate， more transverse septa of mycelium， denser had clamp connection of mycelium ， and the vacuole and cell nuclear were easier to be observed.
Key words： Lentinus edodes； Pleurotus eryngii； training condition； hyphase form； colony
香菇（Lentinus edodes），又名香菌，是側耳科植物香菌的子实体，营养价值高[1]。香菇的培养过程中，菌丝生长速度常常作为早期重要指标广泛应用于菌种特性评价和育种筛选工作中[2]。
杏鲍菇（Pleurotus eryngii），又名刺芹侧耳，杏鲍菇菌肉肥厚，质地脆嫩，营养丰富，具有杏仁香味[3]，有较高的食用价值和药用价值，具有润肠、美容、抗肿瘤等作用，是联合国粮农组织向世界各国推荐的食用菌新品[4]。
食用菌的菌丝在不同培养条件下，生长状态有所不同，菌丝形态、生长速度、生长势等特征存在差异[5]。本文通过控制pH值和营养液浓度，观察香菇和杏鲍菇菌丝形态和菌落特征，最终确定单因素条件下两种食用菌菌丝培养的最佳环境，为食用菌子实体的生长和大规模栽培提供一定的理论依据。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试材料 香菇和杏鲍菇为市售。
1.1.2 试剂 固体PDA培养基；市售营养液为浓缩液体肥，其配方包括大量元素氮（30 g·L-1）、磷（15 g·L-1）、氧化钾（17.5 g·L-1），中量元素氧化镁（1.3 g·L-1）、硫（1.7 g·L-1）外，还含有利于植物茁壮成长所备的整合态微量元素，其总含量≥0.2 g·L-1；1 mol·L-1 HCl溶液；1 mol·L-1 KOH溶液。
1.1.3 仪器设备 高压蒸汽灭菌锅，超净工作台，显微镜，电磁炉，水浴锅，6 mm打孔器；烧杯，玻璃棒，三角瓶，培养皿（若干）。
1.2 试验方法
1.2.1 菌种的获取 将香菇和杏鲍菇切成1 cm3小块，酒精浸泡1 min，用滤纸吸干酒精后分别接种在固体PDA培养基中，在温度为25 ℃，湿度为60%条件下进行培养。
1.2.2 pH值条件优化试验 将培养至第7天的香菇和杏鲍菇菌丝用打孔器分别接种在pH值为5，6，7，8，9的固体PDA培养基上，每个pH值培养基接种2组，一组用于菌落观察，另一组用作插片观察[6]，每组重复3次。
1.2.3 营养液浓度优化试验 将培养至第7天的香菇和杏鲍菇菌丝用打孔器分别接种在营养液浓度为0.4%，0.5%，0.6%，0.7%，0.8%的固体PDA培养基上，每个营养液浓度的培养基接种2组，一组用于菌落观察，另一组用作插片观察，每组重复3次。
1.2.4 菌丝形态和菌落的观察 （1）用光学显微镜（物镜40×；油镜100×）进行插片镜检，对其分隔的有无及是否明显，锁状联合的有无及密集程度（不密集，较密集，密集，多密集），液泡和细胞核是否明显等进行观察，并拍照记录；（2）观察菌丝的外观形态和生长势，用“+++”表示生长势好，用“++”表示生长势一般，用“+”表示生长势差，用“-”表示不生长；（3）测量菌落半径，每个平板按照划线测量4个值，取平均值，计算菌落生长半径（cm·d-1）。 2 结果与分析
2.1 pH值条件优化
2.1.1 不同pH值对两种食用菌菌丝形态的影响 从表1和图1可以看出，香菇在pH值6～9时，菌丝有横隔和锁状联合，液泡和细胞核有些较明显，其中pH值为8时有明显分隔，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显；杏鲍菇在pH值为5～9时，菌丝有横隔，有锁状联合，液泡和细胞核有些较明显，其中pH值为6时有明显分隔，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显。
2.1.2 不同pH值对两种食用菌菌落的影响 从表2可以看出，香菇在pH值为5，6，7，9时，菌丝生长势一般或较差，菌落生长半径较小，pH值为8时菌丝生长势好，菌落生长半径最大，为1.95 cm·d-1；杏鲍菇pH值为5，7，8，9时，菌丝生长势一般或较差，菌落生长半径较小，pH值为6时菌丝生长势好，菌落生长半径最大，为2.01 cm·d-1。
2.2 营养液浓度优化
2.2.1 不同营养液浓度对两种食用菌菌丝形态的影响 从表3和图2可以看出，香菇在营养液浓度为0.5%～0.8%时，菌丝有横隔，有锁状联合，液泡和细胞核有些较明显，其中浓度为0.6%时菌丝分隔明显，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显；杏鲍菇在营养液浓度为0.4%～0.8%时，菌丝有横隔，有锁状联合，液泡和细胞核有些较明显，其中浓度为0.6%时菌丝分隔明显，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显。
2.2.2 不同营养液浓度对两种食用菌菌落的影响 从表4可以看出，香菇在营养液浓度为0.4%，0.5%，0.7%，0.8%时，菌丝生长势一般或较差，菌落生长半径较小，营养液浓度为0.6%时，菌丝生长势最好，菌落生长半径最大，为2.28 cm·d-1；杏鲍菇在营养液浓度为0.4%，0.5%，0.7%，0.8%时，菌丝生长势一般或较差，菌落生长半径较小，营养液浓度为0.6%时菌丝生长势最好，菌落生长半径最大，为1.85 cm·d-1。
3 结论与讨论
食用菌菌丝在不同的外界条件影响下其生长特性均有不同的表现，其显微形态结构的表现与外在形态之间具有一定的关联特征。当外界条件适宜菌丝生长时，菌丝表现为生长速度快、长势好，其显微形态结构通常表现为菌丝间横隔长，锁状连合密集，并且液泡和细胞核容易观察到。当外界条件不适宜菌丝生长时，菌丝表现为生长速度慢，长势差，其显微形态结构通常表现为菌丝横隔短，锁状连合不密集，并且液泡和细胞核不容易观察到[6]。
本试验在研究不同pH值条件对两种食用菌菌丝形态的影响时，发现香菇和杏鲍菇分别在pH值8.0和pH值6.0时生长势最好，菌丝横隔明显，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显，最大生长半径分别为1.95 cm·d-1和2.01 cm·d-1；在研究不同营养液浓度对两种食用菌的影响时，发现香菇和杏鲍菇均在浓度为0.6%时生长势最好，菌丝生长速度快，横隔明显，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显，最大生长半径分别为2.28 m·d-1和1.85 cm·d-1。与张颖等[7]在研究外界环境对香菇菌丝体生长影响中香菇最适pH值不同，主要原因在于所用培养基配方存在本质上差异导致，本试验所采用的仅是普通的固体PDA培养基。
参考文献：
[1]徐思炜，张君胜，周雯.香菇液体菌种培养条件优化[J].江蘇农业科学，2014，42（12）：290-292.
[2]宋春艳，杨晓春，张丹，等.香菇L808菌株自交子代在变温培养中菌丝生长速度的分化[J].食用菌学报，2015，22（3）：17-20.
[3]田景花，李明，李守勉.我国杏鲍菇生产研究进展[J].北方园艺，2013，37（4）：179.
[4]暴增海，马桂珍. 杏鲍菇多糖和营养成分的研究现状[J]. 北方园艺，2007（6）：239-240.
[5]郑国杨，廖汉泉. 中国草菇生产[M].北京.中国农业出版社，2000：99-148.
[6]郭勇，叶小金. 不同温度和光照培养条件下3种食用菌菌丝的菌落及菌丝形态的研究[J]. 西南农业学报，2011，24（6）：2301-2306.
[7]张颖，陶佳喜.外界环境对香菇菌丝体生长的影响[J].湖北农业科学，2001（6）：58-60.
关键词：香菇；杏鲍菇；培养条件；菌丝形态；菌落
中图分类号：S646 文献标识码：A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2018.09.013
Optimization of Medium pH and Nutrient Solution Concentration of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii
HU Min， DU Baohai， BI Xiaojuan， SUN Meng， LIN Jiaying， MENG Xiangsen
（College of Life Science ， Daqing Normal University， Daqing， Heilongjiang 163712， China）
Abstract： In order to optimize the conditions of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii， the experiment was conducted to study the mycelial morphology and the colony growth in different pH and nutrient solution concentration， selecting the optimal environment for the growth. The results showed that the optimum pH of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii were 8.0 and 6.0 respectively， the optimum nutrient solution concentration were both 0.6%. Compared with the other conditions， the two edible fungi under the optimized condition had faster growth rate， more transverse septa of mycelium， denser had clamp connection of mycelium ， and the vacuole and cell nuclear were easier to be observed.
Key words： Lentinus edodes； Pleurotus eryngii； training condition； hyphase form； colony
香菇（Lentinus edodes），又名香菌，是側耳科植物香菌的子实体，营养价值高[1]。香菇的培养过程中，菌丝生长速度常常作为早期重要指标广泛应用于菌种特性评价和育种筛选工作中[2]。
杏鲍菇（Pleurotus eryngii），又名刺芹侧耳，杏鲍菇菌肉肥厚，质地脆嫩，营养丰富，具有杏仁香味[3]，有较高的食用价值和药用价值，具有润肠、美容、抗肿瘤等作用，是联合国粮农组织向世界各国推荐的食用菌新品[4]。
食用菌的菌丝在不同培养条件下，生长状态有所不同，菌丝形态、生长速度、生长势等特征存在差异[5]。本文通过控制pH值和营养液浓度，观察香菇和杏鲍菇菌丝形态和菌落特征，最终确定单因素条件下两种食用菌菌丝培养的最佳环境，为食用菌子实体的生长和大规模栽培提供一定的理论依据。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试材料 香菇和杏鲍菇为市售。
1.1.2 试剂 固体PDA培养基；市售营养液为浓缩液体肥，其配方包括大量元素氮（30 g·L-1）、磷（15 g·L-1）、氧化钾（17.5 g·L-1），中量元素氧化镁（1.3 g·L-1）、硫（1.7 g·L-1）外，还含有利于植物茁壮成长所备的整合态微量元素，其总含量≥0.2 g·L-1；1 mol·L-1 HCl溶液；1 mol·L-1 KOH溶液。
1.1.3 仪器设备 高压蒸汽灭菌锅，超净工作台，显微镜，电磁炉，水浴锅，6 mm打孔器；烧杯，玻璃棒，三角瓶，培养皿（若干）。
1.2 试验方法
1.2.1 菌种的获取 将香菇和杏鲍菇切成1 cm3小块，酒精浸泡1 min，用滤纸吸干酒精后分别接种在固体PDA培养基中，在温度为25 ℃，湿度为60%条件下进行培养。
1.2.2 pH值条件优化试验 将培养至第7天的香菇和杏鲍菇菌丝用打孔器分别接种在pH值为5，6，7，8，9的固体PDA培养基上，每个pH值培养基接种2组，一组用于菌落观察，另一组用作插片观察[6]，每组重复3次。
1.2.3 营养液浓度优化试验 将培养至第7天的香菇和杏鲍菇菌丝用打孔器分别接种在营养液浓度为0.4%，0.5%，0.6%，0.7%，0.8%的固体PDA培养基上，每个营养液浓度的培养基接种2组，一组用于菌落观察，另一组用作插片观察，每组重复3次。
1.2.4 菌丝形态和菌落的观察 （1）用光学显微镜（物镜40×；油镜100×）进行插片镜检，对其分隔的有无及是否明显，锁状联合的有无及密集程度（不密集，较密集，密集，多密集），液泡和细胞核是否明显等进行观察，并拍照记录；（2）观察菌丝的外观形态和生长势，用“+++”表示生长势好，用“++”表示生长势一般，用“+”表示生长势差，用“-”表示不生长；（3）测量菌落半径，每个平板按照划线测量4个值，取平均值，计算菌落生长半径（cm·d-1）。 2 结果与分析
2.1 pH值条件优化
2.1.1 不同pH值对两种食用菌菌丝形态的影响 从表1和图1可以看出，香菇在pH值6～9时，菌丝有横隔和锁状联合，液泡和细胞核有些较明显，其中pH值为8时有明显分隔，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显；杏鲍菇在pH值为5～9时，菌丝有横隔，有锁状联合，液泡和细胞核有些较明显，其中pH值为6时有明显分隔，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显。
2.1.2 不同pH值对两种食用菌菌落的影响 从表2可以看出，香菇在pH值为5，6，7，9时，菌丝生长势一般或较差，菌落生长半径较小，pH值为8时菌丝生长势好，菌落生长半径最大，为1.95 cm·d-1；杏鲍菇pH值为5，7，8，9时，菌丝生长势一般或较差，菌落生长半径较小，pH值为6时菌丝生长势好，菌落生长半径最大，为2.01 cm·d-1。
2.2 营养液浓度优化
2.2.1 不同营养液浓度对两种食用菌菌丝形态的影响 从表3和图2可以看出，香菇在营养液浓度为0.5%～0.8%时，菌丝有横隔，有锁状联合，液泡和细胞核有些较明显，其中浓度为0.6%时菌丝分隔明显，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显；杏鲍菇在营养液浓度为0.4%～0.8%时，菌丝有横隔，有锁状联合，液泡和细胞核有些较明显，其中浓度为0.6%时菌丝分隔明显，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显。
2.2.2 不同营养液浓度对两种食用菌菌落的影响 从表4可以看出，香菇在营养液浓度为0.4%，0.5%，0.7%，0.8%时，菌丝生长势一般或较差，菌落生长半径较小，营养液浓度为0.6%时，菌丝生长势最好，菌落生长半径最大，为2.28 cm·d-1；杏鲍菇在营养液浓度为0.4%，0.5%，0.7%，0.8%时，菌丝生长势一般或较差，菌落生长半径较小，营养液浓度为0.6%时菌丝生长势最好，菌落生长半径最大，为1.85 cm·d-1。
3 结论与讨论
食用菌菌丝在不同的外界条件影响下其生长特性均有不同的表现，其显微形态结构的表现与外在形态之间具有一定的关联特征。当外界条件适宜菌丝生长时，菌丝表现为生长速度快、长势好，其显微形态结构通常表现为菌丝间横隔长，锁状连合密集，并且液泡和细胞核容易观察到。当外界条件不适宜菌丝生长时，菌丝表现为生长速度慢，长势差，其显微形态结构通常表现为菌丝横隔短，锁状连合不密集，并且液泡和细胞核不容易观察到[6]。
本试验在研究不同pH值条件对两种食用菌菌丝形态的影响时，发现香菇和杏鲍菇分别在pH值8.0和pH值6.0时生长势最好，菌丝横隔明显，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显，最大生长半径分别为1.95 cm·d-1和2.01 cm·d-1；在研究不同营养液浓度对两种食用菌的影响时，发现香菇和杏鲍菇均在浓度为0.6%时生长势最好，菌丝生长速度快，横隔明显，锁状联合多密集，液泡和细胞核明显，最大生长半径分别为2.28 m·d-1和1.85 cm·d-1。与张颖等[7]在研究外界环境对香菇菌丝体生长影响中香菇最适pH值不同，主要原因在于所用培养基配方存在本质上差异导致，本试验所采用的仅是普通的固体PDA培养基。
参考文献：
[1]徐思炜，张君胜，周雯.香菇液体菌种培养条件优化[J].江蘇农业科学，2014，42（12）：290-292.
[2]宋春艳，杨晓春，张丹，等.香菇L808菌株自交子代在变温培养中菌丝生长速度的分化[J].食用菌学报，2015，22（3）：17-20.
[3]田景花，李明，李守勉.我国杏鲍菇生产研究进展[J].北方园艺，2013，37（4）：179.
[4]暴增海，马桂珍. 杏鲍菇多糖和营养成分的研究现状[J]. 北方园艺，2007（6）：239-240.
[5]郑国杨，廖汉泉. 中国草菇生产[M].北京.中国农业出版社，2000：99-148.
[6]郭勇，叶小金. 不同温度和光照培养条件下3种食用菌菌丝的菌落及菌丝形态的研究[J]. 西南农业学报，2011，24（6）：2301-2306.
[7]张颖，陶佳喜.外界环境对香菇菌丝体生长的影响[J].湖北农业科学，2001（6）：58-60.