皮下注射以CpG寡脱氧核苷酸为佐剂的人乳头瘤病毒多肽疫苗对小鼠原位宫颈癌的抑制作用研究

来源 :中国妇幼保健 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianxiang521
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目的 研究皮下注射以CpG寡脱氧核苷酸为佐剂的人乳头瘤病毒(HPV)多肽疫苗对小鼠原位宫颈癌的抑制作用。方法 采用6~8周C57BL/6小鼠,通过将TC-1细胞直接注入子宫颈附近的阴道黏膜下层来模拟原位宫颈癌的发生,建立小鼠原位宫颈癌模型,分析以CpG ODN作为佐剂的HPV E7多肽疫苗对小鼠肿瘤生长的抑制作用;应用流式细胞术研究以CpG ODN作为佐剂的HPV E7多肽疫苗对C57BL/6小鼠宫颈局部肿瘤微环境的影响;制备负载HPV 16 E7多肽和佐剂CpG ODN的甘露糖修饰脂质体疫苗,利用透射电镜观察甘露糖修饰的脂质体疫苗形态,利用激光粒度分析仪在水中测量脂质体疫苗的粒度分布和zeta电位,应用荷宫颈癌的小鼠,研究负载HPV 16 E7多肽和佐剂CpG ODN的甘露糖修饰脂质体疫苗对晚期宫颈癌的治疗作用;应用流式细胞术研究脂质体疫苗对小鼠产生特异性细胞免疫应答的影响;应用qRT-PCR研究肿瘤组织中的细胞因子、趋化因子及基质金属蛋白酶(MMP)等表达水平;应用免疫组织化学法研究肿瘤组织中的凋亡、侵袭、血管形成及胶原分布等对小鼠肿瘤微环境的影响。结果 皮下注射CpG ODN为佐剂的HPV多肽治疗性疫苗,可显著增加肿瘤局部浸润的CD4+ T细胞和CD8+ T细胞,降低肿瘤局部的骨髓衍生抑制细胞(MDSCs)、肿瘤相关成纤维细胞(CAFs),调节一系列与肿瘤增殖、侵袭、转移及血管形成相关的细胞因子、趋化因子、MMPs等分子的表达水平。结论 皮下注射CpG ODN为佐剂的HPV多肽治疗性疫苗可抑制已建立的原位宫颈转移瘤的生长。
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