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目的 构建汉坦病毒HTN型和SE0型S基因毕赤酵母表达系统。方法 应用RT—PCR法扩增汉坦病毒Z10株和L99株编码核蛋白的S基因,将扩增产物分别与pGEM-T—Easy载体连接,经序列分析后双酶切,分别定向克隆入载体pPICZaA和pPICZaC,继而将重组质粒以Sac I线性化并电转化入毕赤酵母X33感受态细胞,用Zeocin筛选高拷贝转化子进行鉴定。结果 PCR扩增产物约为1290bp,与T载体相连测序结果与Genbank相应序列比较,核苷酸序列同源性分别为99.84%和99.92%,其编码蛋白质