同时携带人血管内皮生长因子和血管生成素基因的内皮祖细胞血管再生研究

来源 :中华普通外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blueblood008
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目的 用腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体将人血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factors,VEGF165)和血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang1)基因同时转入骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)中,观察外源基因的表达并评价其促血管再生的能力.方法 用同时携带人VEGF165和Ang1基因的AAV载体AAV2-hAng1/VEGF165转染体外培养的兔骨髓源EPCs,用RT-PCR和细胞免疫化学法检测外源基因的表达.实验用新西兰大白兔24只,制作成右下肢缺血模型,随机分成3组:PBS、EPC和EPC/AV组.造模后第10天,向缺血肌组织中分别注射PBS、EPCs和AAV2-hAng1/VEGF165转染的EPCs,用免疫组织化学法评价其血管再生效应.结果 EPCs可高效地被AAV2-hAng1/VEGF165转染而表达Ang1和VEGF165.细胞移植4周后,EPC/AV组存活的EPCs密度(283±137)/mm2明显高于EPC组(191±88)/mm2;EPC/AV组的毛细血管密度(856±212)/mm2明显高于EPC组(564±177/mm2)和PBS组(308±112)/mm2;α-SMA阳性血管密度(6.9±3.0)/mm2明显高于PBS组(3.6±1.8)/mm2,P<0.05.结论 AAV载体可同时将人VEGF165和Ang1基因转入EPCs中,转染后的EPCs具有更强的促血管再生能力。

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