【摘 要】
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目的:构建颗粒溶解素(granulysin)cDNA真核表达载体.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出颗粒溶解素蛋白cDNA,经限制性核酸
【机 构】
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武汉大学医学院微生物学教研室,武汉大学医学院免疫学教研室
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目的:构建颗粒溶解素(granulysin)cDNA真核表达载体.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出颗粒溶解素蛋白cDNA,经限制性核酸内切酶消化后,插入真核表达载体pcDNA3.1(-)的相应酶切位点,将此重组质粒进行序列测定,并将重组质粒转染COS7细胞,进行基因表达鉴定. 结果:重组质粒插入基因序列测定证实为颗粒溶解素cDNA,并能在COS7细胞稳定表达. 结论:成功构建颗粒溶解素真核表达载体,为进一步研究其抗结核作用奠定了基础.
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