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目的：构建一种新型表达载体（pEDCC），表达并纯化得到人源胰岛素原C肽。方法：将编码截短的门冬酰胺酶突变体（ansB-C），天然C肽，人IgG1铰链区（hinge），额外的酸敏感二肽（DP）以及富含碱性氨基酸的8肽（KRKRKKSR）的核苷酸序列依次分别插入pET28a载体中，构建表达载体pEDCC。在乳糖的诱导下，融合蛋白ansB-C—hinge-DPKRKRKKSRNGSGR-C-peptide以包涵体形式高效表达。融合蛋白经洗涤和乙醇分级沉淀纯化后，通过酸水解将PKRKRKKSRNGSGR-C-p