克氏针茅ISSR-PCR反应体系的建立与优化

来源 :草业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangshuanghong2009
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采用正交试验与单因素设计相结合的方法,对克氏针茅ISSR—PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA、Mg^2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化筛选,确立了适合克氏针茅ISSR分析的优化反应体系。在25μL反应体系中各反应成分为:模板DNA50ng,Mg^2+ 1.5mmol/L,dNTP0.2mmol/L,引物0.8μmol/L,TaqDNA聚合酶1U,10×buffer 2.5μL。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行克氏针茅遗传多样性分析、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术
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