红花非生物胁迫相关CtDHN1基因的克隆及功能研究

来源 :中国油料作物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xinglink
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脱水素(Dehydrins)属于LEA (Late embrygenesis abundant protein)蛋白家族的第二亚家族成员,是一类高度无序的响应逆境胁迫的蛋白。本研究通过对前期红花干旱胁迫转录组数据的挖掘,利用RT-PCR(reverse transcription-PCR)方法从油料作物红花中首次克隆得到一条全长为957bp响应干旱胁迫脱水素基因序列,命名为CtDHN1,其编码318个氨基酸,预测分子量为31.1kDa,等电点为6.36。生物信息学分析表明CtDHN1蛋白属于YnSKn型脱水素,原核表达分析表明CtDHN1蛋白为可溶性蛋白,在IPTG浓度为0.4mmol/L,OD600值为0.8,诱导时间为4h,诱导温度为37℃时表达量最高。大肠杆菌耐逆性分析表明CtDHN1基因可耐受1.5mol/L山梨醇和1.3mol/L氯化钠的干旱和高盐环境。体外酶活测定表明CtDHN1蛋白在500mmol/L山梨醇和300mmol/L氯化钠环境下可保护LDH酶活性。本研究初步鉴定红花脱水素蛋白的功能,为研究CtDHN1基因在红花抵抗非生物胁迫中的分子机制提供理论基础。
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