本试验旨在利用16S rDNA高通量测序分析技术研究甘露寡糖对奶牛瘤胃菌群结构的影响。选择泌乳阶段相近、胎次相同的泌乳早期奶牛4头,随机分为2组,对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮,同时添加60 g/头甘露寡糖,通过口腔灌注添加。采用2×2交叉试验设计,每期21 d,预试期14 d,采样期7 d。结果表明:1)与对照组相比,添加甘露寡糖极显著提高了瘤胃液乙酸的浓度(P<0.01),乙酸/丙酸提高了8.47%(P>0.05)。2)与对照组相比,门水平上,试验组蓝藻门相对丰度极显著降低(P <0.01),装甲菌门的相对丰度极显著提高(P <0.01);属水平上,试验组厌氧螺菌属的相对丰度显著提高(P <0.05),梭菌属的相对丰度显著降低(P<0.05),锥形杆菌属的相对丰度极显著降低(P<0.01),瘤胃球菌属、假丁酸弧菌属以及毛螺菌属的相对丰度分别增加24.34%、12.83%、31.80%(P>0.05),普雷沃氏菌属的相对丰度降低4.66%(P>0.05),未注释韦荣氏菌属的相对丰度提高143.11%(P> 0.05),脱硫弧菌属的相对丰度提高4.88%(P>0.05)。在本试验条件下,添加甘露寡糖降低了瘤胃细菌的多样性,对纤维素降解菌群、半纤维素降解菌群影响明显,显著提高了瘤胃液乙酸浓度,提高了瘤胃液pH,但差异不显著。