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目的：分别将两段PCR产物hTERT及E1定向克隆到载体pShuttle中以构建重组质粒pShuttle—hTERT—E1。方法：在合成PCR引物时两端对应加入线性化载体两端的15个碱基，这样PCR得到的产物两端就分别带上了15个和线性化载体两端重复的碱基序列，将纯化的产物与线性化载体以摩尔数为2：1比例混和，溶于10μl的去离子水中，加入In—Fusion重组酶，在42％下反应30分钟后转化，就可以实现类似同源重组的反应，将PCR产物定向克隆入目标载体上。结果：经签定，成功构建出重组质粒pShuttle