猪瘟病毒E^rns基因的克隆及原核表达

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从猪瘟病毒石门株血液样品中提取总RNA,通过RT—PCR对E^rns基因进行cDNA扩增,获得了696bp的片段。将该片段克隆于T—easy载体后进行序列分析,确认PCR产物为猪瘟病毒E^rns基因,从阳性克隆中提取质粒,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切,回收产物亚克隆到pET-32a表达载体中,提取质粒后转化BL21(DE3)感受态细胞,并筛选出阳性克隆,经IPTG诱导后通过SDS-PAGE检测出E^rns基因的表达。
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