【摘 要】
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目的观察不同浓度5-氮杂-2′-脱氧胞苷对人胃癌BCG-823细胞系增殖及对HOXA5基因表达的影响。方法用不同浓度的5-氮杂-2′-脱氧胞苷处理培养的胃癌BCG-823细胞株,然后用甲基化特异性PCR(MSP)法检测处理前后的胃癌BCG-823细胞株中HOXA5基因启动子甲基化的情况;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长抑制率;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(QRT-PCR)法检测HOXA5基因
【机 构】
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410005 长沙,湖南省人民医院 湖南师范大学第一附属医院结直肠肛门外科,410005 长沙,湖南省人民医院 湖南师范大学第一附属医院结直肠肛门外科,
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目的观察不同浓度5-氮杂-2′-脱氧胞苷对人胃癌BCG-823细胞系增殖及对HOXA5基因表达的影响。
方法用不同浓度的5-氮杂-2′-脱氧胞苷处理培养的胃癌BCG-823细胞株,然后用甲基化特异性PCR(MSP)法检测处理前后的胃癌BCG-823细胞株中HOXA5基因启动子甲基化的情况;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长抑制率;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(QRT-PCR)法检测HOXA5基因mRNA表达水平;Western-blot法检测HOXA5蛋白的表达水平。
结果⑴BCG-823细胞株中HOXA5基因启动子存在不同程度的甲基化,5-氮杂-2′-脱氧胞苷可降低这种基因启动子的甲基化率,且与其浓度有关(F=438.307,P<0.01)。⑵5-氮杂-2′-脱氧胞苷处理的细胞组中,HOXA5基因mRNA和蛋白表达量较对照组均有明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。⑶5-氮杂-2′-脱氧胞苷作用BCG-823细胞后,细胞增殖明显受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论胃癌BCG-823细胞中HOXA5基因启动子可能存在高甲基化;5-氮杂-2′-脱氧胞苷能抑制BCG-823细胞体外增殖,其可能通过诱导HOXA5基因表达增加而发挥抗癌作用,有望为胃癌的综合治疗提供新线索。
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