【摘 要】
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利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),比较接种炭疽病菌与未接菌草莓之间的基因表达差异,筛选抗草莓炭疽病菌的差异表达基因片段,为草莓抗炭疽
【机 构】
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浙江省农业科学院园艺研究所,浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所
【基金项目】
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浙江省自然科学基金“抑制消减杂交法分离草莓抗炭疽病致病菌C.gloeosporioides的候选基因”(Y3080471)和“草莓体细胞无性系变异调控研究”(Y3080175), 浙江省农科院科技创新能力提升工程“水果安全生产保障关键技术研究示范”(2009R05Y01D01), 浙江省优先主题“草莓育苗关键技术及高设栽培研究与示范”(2009C12073)
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利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),比较接种炭疽病菌与未接菌草莓之间的基因表达差异,筛选抗草莓炭疽病菌的差异表达基因片段,为草莓抗炭疽病遗传育种提供理论依据。分别提取接种草莓与未接种草莓叶片的总RNA,分离mRNA,逆转录成cDNA,利用RsaI进行酶切,然后以接种叶片酶切cDNA为试验方(tester),以未接菌草莓叶片酶切cDNA为驱动方(driver),构建了草莓抗炭疽病基因消减文库。菌落PCR结果表明,插入片段大部分在100
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