【摘 要】
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目的采取免疫学方法筛选华支睾吸虫成虫cDNA表达文库,寻找新的抗原基因。方法使用华支睾吸虫病人混合血清以及华支睾吸虫排泄分泌抗原的免疫小鼠血清,分别免疫学筛选华支睾吸
【机 构】
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中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,广西壮族自治区疾病预防控制中心
【基金项目】
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国家科技支撑计划项目（No.2008BAI56B03）, 国家科技重大专项（No.2009ZX10004-302）联合资助（中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所健康教育咨询检测中心提供日本血吸虫、猪囊尾蚴病人血清,该中心李浩主管技师提供卫氏并殖吸虫病人血清,特此一并感谢.）
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目的采取免疫学方法筛选华支睾吸虫成虫cDNA表达文库,寻找新的抗原基因。方法使用华支睾吸虫病人混合血清以及华支睾吸虫排泄分泌抗原的免疫小鼠血清,分别免疫学筛选华支睾吸虫成虫λZAP cDNA表达文库;将阳性噬菌体克隆、测序以及核苷酸序列比对分析;将目的基因的编码区克隆至原核表达质粒pET28a（＋）中,采用制备不带N端融合标签的天然蛋白的策略表达融合蛋白,使用组氨酸标签亲和纯化柱（Ni-NTA树脂）纯化融合蛋白;采用间接ELISA法,检测血清中的特异性抗体,共检测35例华支睾吸虫虫卵粪检阳性血清,36例正
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