我们先前的研究证实姜黄素可抑制体外培养的人晶状体上皮细胞(LECs)的增生并影响细胞中环磷酸腺苷(cAMP)和环磷鸟嘌呤核苷(cGMP)的信号转导过程,但实际上体内LECs生物学行为的调控机制非常复杂。
目的探讨姜黄素抑制体外培养的HLE-B3细胞增生过程中蛋白激酶(PK)通路的信号转导变化。
方法HLE-B3经培养和传代后分为空白对照组、重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)组和rhbFGF+姜黄素组。rhbFGF组在培养液中添加10 ng/ml rhbFGF,rhbFGF+姜黄素组在rhbFGF培养的基础上添加20 mg/L姜黄素作用于细胞24 h,利用流式细胞术检测各组细胞内PKA、PKC、PKG和钙调蛋白(CaM)的表达率。
结果空白对照组、rhbFGF组和rhbFGF+姜黄素组HLE-B3细胞中PKA蛋白的表达率分别为(46.847±1.673)%、(33.250±2.242)%和(71.645±2.432)%,rhbFGF组较空白对照组PKA蛋白的表达率明显下降,而rhbFGF+姜黄素组较rhbFGF组明显升高,差异均有统计学意义(t=11.904、28.430,均P<0.01)。空白对照组、rhbFGF组和rhbFGF+姜黄素组细胞中PKC蛋白的表达率分别为(35.575±1.937)%、(50.652±2.068)%和(27.662±4.481)%,PKG蛋白的表达率分别为(63.838±0.486)%、(86.562±1.325)%和(40.733±2.175)%,CaM蛋白的表达率分别为(67.408±1.391)%、(83.887±3.499)%和(53.785±1.942)%,其中rhbFGF组细胞中PKC、PKG和CaM蛋白的表达率均明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01),而rhbFGF+姜黄素组细胞中PKC、PKG和CaM蛋白的表达率均明显低于rhbFGF组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。
结论姜黄素对HLE-B3细胞增生的抑制作用可能与其上调细胞中PKA的表达和下调PKC、PKG和CaM的表达有关。