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目的:构建野生型PTEN基因真核表达载体pcDNA3.0-PTEN,并进行鉴定.方法:参照野生型PTEN基因mRNA全序列,在cDNA两端各设计一条对应引物,并引入各自的酶切位点.从正常人外周血淋巴细胞中提取mRNA作为模板合成PTEN cDNA第一链,并扩增目的基因全表达序列片段,经双酶切后定向克隆至pcDNA3.0真核表达载体中,蓝白斑试验筛选阳性重组质粒.分别经双酶切、特异PCR及测序法对重组质粒进行鉴定.结果:双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约为1.2 kb;测序法进一步证实该基因为野生型