目的探讨建立人肝细胞L-02单纯肝脂肪变性细胞模型的方法与模型的应用。方法体外用1640培养基培养L-02细胞,分为模型组和正常组。当细胞融合达到70%~80%,正常组换用新鲜1640培养液,而模型组改为含有游离脂肪酸(油酸和棕榈酸)混合物的1640培养基诱导培养24 h。以油红O染色定性观察细胞内脂滴并通过显色比较各组间总脂质差别,模型鉴定采用观察细胞内脂滴形态,检测细胞内甘油三酯和细胞培养上清丙二醛含量,并检测细胞凋亡情况;同时利用此模型观察护肝清脂片对脂肪变性肝细胞内脂滴的影响。结果模型组L-02细胞内脂滴大量形成,且甘油三酯明显升高,而培养液中肝酶释放量及丙二醛较正常组没有明显升高,且凋亡率没有明显增加;护肝清脂片含药血清两次给药,可以使细胞内脂滴和甘油三酯明显减少。结论采用油酸和棕榈酸混合物(油酸∶棕榈酸=2∶1)可以成功诱导L-02细胞脂肪变性,该模型适用于治疗脂肪肝药物的研究。