【摘 要】
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本研究旨在克隆、鉴定鸭TLR4基因的可变剪接体,并对TLR4基因的可变剪接体表达规律进行分析。根据GenBank中鸭TLR4基因的mRNA序列(登录号:JN048668)设计引物,利用RT-PCR扩增鸭
【机 构】
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江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室; 江西农业大学动物科学技术学院; 国家水禽种质资源基因库;
【基金项目】
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现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-43-3);江苏高校优势学科建设工程资助项目(苏政办发【2011】137号)
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本研究旨在克隆、鉴定鸭TLR4基因的可变剪接体,并对TLR4基因的可变剪接体表达规律进行分析。根据GenBank中鸭TLR4基因的mRNA序列(登录号:JN048668)设计引物,利用RT-PCR扩增鸭CDS区,以获取TLR4可变剪接体;并通过构建雏鸭PolyI:C感染模型,利用qRT-PCR检测TLR4可变剪接体的时空表达变化。结果,获得一种鸭TLR4基因新的可变剪接体(TLR4-b),并鉴定其剪接形式为跨内含子剪接。组织表达分析表明,TLR4基因的表达主要以野生型(TLR4-a)为主,且在PolyI:C等抗原刺激后,肺、脾脏等组织中TLR4-a mRNA表达量总体表现为先上升,后下降,而TLR4-b表达变化不大。本研究成功克隆并鉴定了鸭TLR4基因新的可变剪接体,在正常情况下TLR4-a表达量显著高于TLR4-b,在PolyI:C感染下,TLR4-a表现为先上升,后下降。研究结果初步揭示了鸭TLR4基因可变剪接体的结构,且其功能主要取决于TLR4-a。
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