【摘 要】
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目的 探讨miR-610对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制.方法 应用real-time PCR法检测miR-610在高低不同转移潜能肺癌细胞株95D和95C中的表达.分别将miR-610模拟物和抑制
【机 构】
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吉林大学中日联谊医院内镜中心, 长春,130033;天津医科大学总医院天津市肺癌研究所天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室;
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目的 探讨miR-610对肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制.方法 应用real-time PCR法检测miR-610在高低不同转移潜能肺癌细胞株95D和95C中的表达.分别将miR-610模拟物和抑制物转染入95D和95C细胞,应用细胞计数盒8(CCK-8)法和5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)掺入实验检测miR-610对肺癌细胞增殖的影响;应用划痕实验和Transwell侵袭实验检测miR-610对肺癌细胞侵袭的影响.以生物信息学软件预测miR-610的潜在靶基因,采用双荧光素酶报告基因系统和West blot法验证miR-610对缝隙连接α3蛋白(GJA3)表达的调控作用.结果 miR-610在低转移肺癌细胞95C中的表达水平是其在高转移肺癌细胞95D中的表达水平的(8.75±0.21)倍(P＜0.01).空白对照组和转染miR-610抑制物组95C细胞的增殖细胞数分别为(37.41±2.39)％和(59.63±4.57)％,空白对照组和转染miR-610模拟物组95D细胞的增殖细胞数分别为(68.75±4.28)％和(46.13±3.27)％,差异均有统计学意义(均P＜0.01).划痕24h和48 h后,转染miR-610抑制物组95C细胞划痕的宽度分别为初始划痕宽度的(58.74±4.62)％和(34.63 ±2.73)％,均明显低于空白对照组和转染miR-610抑制物对照组(均P＜0.01);转染miR-610模拟物组95D细胞划痕的宽度分别为初始划痕宽度的(88.59±6.92)％和(72.24±5.46)％,均明显高于空白对照组和转染miR-610模拟物对照组(均P＜0.01).转染miR-610抑制物对照组、转染miR-610抑制物组95C细胞的侵袭细胞数分别为(112.4±10.6)个/空格和(161.8 ±12.5)个/空格,转染miR-610模拟物对照组、转染miR-610模拟物组95D细胞的侵袭细胞数分别为(178.4±12.3)个/空格和(76.7±5.8)个/空格,差异均有统计学意义(均P＜ 0.01).miRanda软件预测、双荧光素酶报告基因系统和West blot法检测结果均表明,GJA3是miR-610调控的靶基因.结论 miR-610通过调控GJA3的表达抑制肺癌细胞的增殖和侵袭.
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