吸烟者肺癌组织T7噬菌体cDNA文库构建

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目的:为筛选吸烟人群中早期肺癌肿瘤标志物,构建吸烟者肺癌组织T7噬菌体展示cDNA文库。方法:用RNeasy Mini Kit提取吸烟者肺癌组织总RNA,分离纯化mRNA,逆转录合成双链cDNA,经末端修饰、定向EcoRI/HindIII接头连接、接头消化,使其两端分别带有EcoRI和HindIII粘性末端。用Mini Column分离cDNA片段,收集300 bp以上的双链cDNA,与T7Select 10-3b载体连接,体外包装后,以BLT5615为受体菌得到吸烟者肺癌组织T7噬菌体展示cDNA文库。
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